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更新時(shí)間:2017-07-10 12:19:35瀏覽次數(shù):177次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
包涵體溶解液100ml售后服務(wù)使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
包涵體溶解液100ml售后服務(wù)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
包涵體溶解液100ml售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
FGF7 Protein Human 重組人 FGF7 / FGF-7 / KGF 蛋白 (His 標(biāo)簽)
大鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
IL2RG Others Rat 大鼠 IL2RG / CD132 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
U-937人組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞 Cell lymphoma cells in human tissue U-937 RPMI-1640+10%FBS
人脾臟成纖維細(xì)胞HSF
2V6.11(人胚腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
小鼠肺腺癌細(xì)胞系;LA795
CRELD1 Others Human 人 CRELD1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
SH-SY5Y人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 SH-SY5Y human neuroblastoma cells MEM/F-12(1:1)+10%FBS
SF17細(xì)胞,人腦瘤細(xì)胞 洋蔥假單胞菌 人角膜細(xì)胞總RNAHK tRNA
RL1(大鼠肺成纖維樣細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
GNM(人口腔鱗癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0320BC3H1(小鼠腦瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 小型豬腎細(xì)胞;MPK
LSAMP Others Human 人 LSAMP 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人羊膜細(xì)胞;WISH
HCT 116 人結(jié)腸癌細(xì)胞
OS-RC-2人腎癌細(xì)胞 Human renal cell carcinoma OS-RC-2 cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
TNFSF13B Protein Human 重組人 BLyS / TNFSF13B / BAFF 蛋白
大鼠垂體細(xì)胞(RPC)(1×106) A549/DDP, 人肺腺癌耐藥細(xì)胞株 Human
大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒 ,英文名: sRANKL ELISA Kit
人神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(NT-3)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanNeurotrophin-3,NT-3ELISAKIT 96T/48T
核黃素轉(zhuǎn)運(yùn)因子2(RFT2)免疫試劑盒 Human riboflavin transporter 2,RFT2 ELISA Kit
CLIAKitforomentin(Mouseomentin)ELISAKit小鼠網(wǎng)膜素規(guī)格:48T/96T
糖原酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitIFN-γ人γ干擾素規(guī)格:48T/96T
人載脂蛋白C3(APO-C3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat tumor specific growth factor / tumor associated factor (TSGF) ELISA Kit 大鼠特異生長(zhǎng)因子/相關(guān)因子(TSGF)ELISA試劑盒
HumanNeuroglobin,NGBELISAKit 人腦紅蛋白(NGB)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanInhibin,INH-AELISA試劑盒人抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-8)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
HumanLeishimariaantibodyELISAKit人利什曼原蟲抗體(LeishimariaAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
包涵體溶解液100ml售后服務(wù)大鼠多巴胺(DA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠端粒酶(TE)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠受體(M-AChR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠*(AZT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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