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包涵體溶解液50ml實驗方法

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更新時間:2017-07-10 12:19:18瀏覽次數(shù):193次

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包涵體溶解液50ml實驗方法公司供應的細胞生物學試劑品種齊全,質(zhì)量保證,*,歡迎廣大科研用戶選購!

包涵體溶解液50ml實驗方法實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
1)取 1060 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
包涵體溶解液50ml實驗方法注意事項
1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
7PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
成纖維細胞生長因子

大鼠腸靜脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL

IL2RG Others Rat 大鼠 IL2RG / CD132 人細胞裂解液 (陽性對照)

SUP-B15Ph+急淋白血病細胞系 SUP-B15 acute lymphoblastic leukemia cell line Ph+ IMDM培養(yǎng)基(GIBCO)+20%FBS

人心臟成纖維細胞HCF

293FT(人胚腎細胞) 5×106cells/瓶×2 支氣管成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
多聚賴氨酸10 mg/mlPLL

CRELD2 Others Mouse 小鼠 CRELD2 人細胞裂解液 (陽性對照)

白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細胞;JEG-3/VP16-IL-2

雜交瘤(B);Z172A4C4C6F3G12 Burkitt's 淋巴瘤細胞,Raji細胞 HBZY-1細胞,大鼠腎小球系膜細胞EC(HBZY-1)

UM-UC-3, 人膀胱移行細胞癌 Human

LILRB3 Others Human LILRB3 / LIR3 / ILT5 / CD85a 人細胞裂解液 (陽性對照)
TNFRSF4 Others Mouse 小鼠 TNFRSF4 / OX40 / CD134 人細胞裂解液 (陽性對照)

人羊膜細胞;WISH

HeLa 229 人細胞

EA.hy926人臍靜脈細胞融合細胞 EA.hy926 human umbilical vein cell fusion cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS

TNFSF9 Protein Mouse 重組小鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 蛋白 (His 標簽)

大鼠條紋神經(jīng)元(RNs)(1×106) C6, 大鼠腦膠質(zhì)瘤細胞 Rattus
大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)免疫試劑盒 Human Neurotrophin-3,NT-3 ELISA KIT

Mousegrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin,GHRP-GhrelinELISAKit小鼠生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

通用型南芥菜花葉病毒(ArabisMosaicVirus;ArMV)基因檢測試劑盒20

Humanmelanocyteantibody,MCAbELISA試劑盒人黑色素細胞抗體(MCAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Humanplacentalprotein,PPELISAKit人胎盤蛋白(PP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人載脂蛋白E(Apo-E)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human TNF related activation induced cytokine (TRANCE) ELISA Kit 人壞死因子相關(guān)激活誘導因子(TRANCE)ELISA試劑盒

Humaninterferon-inducibleprotein16,IFI16/p16ELISAKit 人γ干擾素誘導蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanInhibin,INHELISA試劑盒人抑制素(INH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-7)活性熒光定量檢測試劑盒20

HumanLeptinReceptor,LEPRELISAKit人瘦素受體(LEPR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
包涵體溶解液50ml實驗方法大鼠二胺氧化酶(DAOELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠多巴胺轉(zhuǎn)運蛋白(DAT)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠多巴胺D2受體(D2R)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

我司包涵體溶解液50ml實驗方法本著標準*、質(zhì)量*、服務*、信譽*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務,咨詢!

 

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