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聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
蛋白酶和磷酸酶抑制劑混合物片劑(EDTA Free)1片使用說明書注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時(shí)間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
蛋白酶和磷酸酶抑制劑混合物片劑(EDTA Free)1片使用說明書實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測或流式細(xì)胞儀分析。
我司蛋白酶和磷酸酶抑制劑混合物片劑(EDTA Free)1片使用說明書本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務(wù),咨詢!
EREG Protein Human 重組人 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CD14 Others Rat 大鼠 CD14 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
BV-2小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞 Microglial cells of BV-2 mice 1640+20%FBS
大鼠紋狀體神經(jīng)元RN-s
VE(人血管內(nèi)皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 胰島β細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
CL-0336FC33(人胚胎腎細(xì)胞(Asp-2基因修飾))5×106cells/瓶×2
CS Others Human 人 Citrate synthase / CS 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人腸平滑肌細(xì)胞總RNAHISMC tRNA
山羊皮膚細(xì)胞;WGS1 大鼠心肌細(xì)胞,H9c2細(xì)胞 Ca759細(xì)胞,615小鼠癌瘤株
人胚胎心臟成纖維樣細(xì)胞;HEH2
HA Others H1N2 甲型流感 H1N2 (A/swine/Guangxi/13/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
MME Others Cynomolgus 食蟹猴 CD10 / Neprilysin / MME 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞HAMSC
非洲綠猴腎細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化);COS-1 [COS1]
大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞;RBL-2H3 肝癌細(xì)胞,BEL-7404細(xì)胞 CEL細(xì)胞,雞胚原代肝細(xì)胞
RBE, 人肝膽管癌細(xì)胞 Human
CST2 Others Human 人 CST2 / Cystatin-2 / Cystatin-SA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1(DMP1)ELISA試劑盒 ,英文名: DMP1 ELISA Kit
人蛋白(nephrin)ELISA檢測試劑盒HumanNephrinELISAKit 96T/48T
大鼠TAR DNA結(jié)合蛋白43(TARDBP)免疫試劑盒 Rat TAR DNA-binding protein 43,TARDBP ELISA kit
CLIAKitforSP-R(HumansubstancePreceptor)ELISAKit人P物質(zhì)受體規(guī)格:48T/96T
溶血*LPC(lysophosphatidylcholine)高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitMIP-1β/CCL4人巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β規(guī)格:48T/96T
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Soluble human tumor necrosis factor receptor II (TNFsR- II) ELISA Kit 人壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA試劑盒
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HumanleucocyteantigenB27,HLA-B27ELISAKit人類白細(xì)胞抗原B27(HLA-B27)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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