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更新時間:2017-07-10 12:14:57瀏覽次數(shù):194次
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(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
蛋白酶抑制劑混合物片劑(含EDTA)1片實驗方法實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
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NRG1 Protein Human 重組人 NRG1-beta 1 蛋白 (EGF Domain, Fc 標簽)
大鼠上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
ANTXR1 Others Human 人 ANTXR1 人細胞裂解液 (陽性對照)
LTPA小鼠胰腺癌細胞 LTPA mouse pancreatic cancer cells 1640+10%FBS
小鼠淋巴成纖維細胞MLF
PC-3M(人前列腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
人肺腺癌細胞;Calu-3
CSF1R Others Human 人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
CM-H102表皮角化細胞*培養(yǎng)基100mL
HCT116, 人結直腸癌細胞 垂體瘤,AtT20細胞 COS-7(非洲青猴腎細胞)
小鼠胚胎成纖維細胞;PA317
CD86 Others Mouse 小鼠 CD86 / B7-2 人細胞裂解液 (陽性對照)
ERBB4 Others Mouse 小鼠 HER4 / ErbB4 人細胞裂解液 (陽性對照)
人牙周膜成纖維細胞cDNAHPLF cDNA
人皮膚肥大細胞*培養(yǎng)基 100mL
ψ2細胞,小鼠胚成纖維包裝細胞 Jecket(淋巴瘤細胞) 大鼠肺細胞;WTRL1
EFNA5 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (His 標簽)
A-498(人腎癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠單核巨噬細胞;J774A.1
大鼠轉化生長因子β3(TGF-β3)ELISA試劑盒 ,英文名: TGF-β3 ELISA Kit
人腎上腺素能a1A受體(ADRA1A)ELISA檢測試劑盒Humanadrenergicalpha-1Areceptor,ADRA1AELISAKit 96T/48T
大鼠促腎上皮質激素釋放激素(CRH)免疫試劑盒 Rat corticotropin releasing hormone,CRH ELISA Kit
CLIAKitforTpP(Mousethrombusprecursorprotein)ELISAKit小鼠血栓前體蛋白規(guī)格:48T/96T
氫離子膜通道轉運功能(V型ATP酶)綠色熒光檢測試劑盒20次
ELISAKitAGPA/PCA人抗胃壁細胞抗體規(guī)格:48T/96T
人正常T細胞表達和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat tumor necrosis factor soluble receptor I (TNFsR- I) ELISA Kit 大鼠壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA試劑盒
HumanHeatShockProtein70,HSP-70ELISAKit 人熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanimmunoglobulinheavychain,IgHELISA試劑盒*重鏈(IgH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織基質金屬蛋白酶(MMP-12)活性熒光定量檢測試劑盒20次
HumanleukocyteantigenG,HLA-GELISAKit人類白細胞抗原G(HLA-G)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
蛋白酶抑制劑混合物片劑(含EDTA)1片實驗方法大鼠過敏毒素/補體片斷4a(C4a)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠果糖胺(FA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠胱天蛋白酶8(Casp-8)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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