*蛋白激酶抑制劑100mg實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
*蛋白激酶抑制劑100mg實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō)，也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
*蛋白激酶抑制劑100mg實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
NRG1 Protein Human 重組人 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, Fc 標(biāo)簽)

大鼠胰腺星狀細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

BPIFA2 Others Human 人 BPIFA2 / C20orf70 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

MA104非洲綠猴胚胎腎上皮細(xì)胞 MA104 Africa green monkey embryonic kidney epithelial cells DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS

成骨細(xì)胞培養(yǎng)基ObM

NCI-H661(人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 腎上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
人低侵襲性脈絡(luò)膜黑色素素瘤細(xì)胞;OCM-1A

CSF2 Others Human 人 GM-CSF / CSF2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CoC2(懸浮) 卵巢癌

COLO 205人結(jié)腸癌細(xì)胞 COLO 205 human colon cancer cells 1640+10% FBS

TNFSF8 Protein Rat 重組大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白

人角膜成纖維細(xì)胞 (HcorF)( 5×105 ) EPC, 大鼠血管內(nèi)皮祖細(xì)胞 Rattus
小鼠小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(MM)(5×105)

人雪旺細(xì)胞總RNAHSC tRNA

黃胸鼠肺成纖維細(xì)胞;YCR

C57BL/6小鼠T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞;RMA 小鼠角膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

HBE, 正常人支氣管上皮細(xì)胞系 Human

NLGN1 Others Human 人 NLGN1 / Neuroligin-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
大鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人腎上腺髓質(zhì)素前體(Pro-ADM)免疫試劑盒 Human Proadrenomedullin,Pro-ADM ELISA Kit

MouseGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISAKit小鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

tComplementfragment4a,C4aELISA試劑盒大鼠過(guò)敏毒素/補(bǔ)體片斷4a(C4a)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Humanmatrixmetalloproteinase4,MMP-4ELISA試劑盒人基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanPhosphorylatedacetylCoA,PaCoAELISAKit人磷酸化乙酰輔酶A(PaCoA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat neutrophil gelatinase associated lipocalin (NGAL) ELISA Kit 大鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒

HumanBH3interactingdomaindeathagonist,BidELISAKit 人BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanImmunoglobulinA,IgAELISA試劑盒*A(IgA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-1)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次

Humanleukoregulin，LRELISAKit人白細(xì)胞調(diào)節(jié)素(LR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
*蛋白激酶抑制劑100mg實(shí)驗(yàn)方法大鼠黃體生成素（LH）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠氧化酶（XOD）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠環(huán)氧合酶2（COX-2）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠*(cAMP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝