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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>蛋白提取/檢測>> *蛋白激酶抑制劑500mg免費(fèi)代測
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更新時(shí)間:2017-07-10 12:13:15瀏覽次數(shù):122次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
*蛋白激酶抑制劑500mg免費(fèi)代測使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
*蛋白激酶抑制劑500mg免費(fèi)代測操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
*蛋白激酶抑制劑500mg免費(fèi)代測實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長,否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
NRG1 Protein Human 重組人 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, His 標(biāo)簽)
大鼠胰島細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CLEC1A Others Rat 大鼠 CLEC1A / CLEC-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
MLE-12小鼠肺上皮細(xì)胞株 MLE-12 mouse lung epithelial cell lines DMEM/F12+2%FBS
脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基AdM
NCI-H460(人肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
心肌成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
CSF2 Others Mouse 小鼠 GM-CSF / CSF2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞;RBL-2H3
WI-38AV13細(xì)胞,人SV-40轉(zhuǎn)化肺成纖維細(xì)胞 大鼠胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞,VSMC細(xì)胞 CL-0010786-O(人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
SP2/0(小鼠骨髓瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
HDBEC-c 人類皮膚血內(nèi)皮細(xì)胞(HDBEC)來自少年者 500,000cells 肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
CSF2 Others Rat 大鼠 GM-CSF / CSF2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人雪旺細(xì)胞裂解物HSCL
人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞;C918
HuH-7細(xì)胞,人肝癌細(xì)胞 小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞,P388D1細(xì)胞 小型豬腎細(xì)胞;MPK
MDA-MB-435S(人導(dǎo)管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-22121 Endothelial Cell GrowthMedium MV 2 KIT, 內(nèi)皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基MV2套裝 500ml
大鼠組織蛋白去乙?;?/span>(HD)ELISA試劑盒 ,英文名: HD ELISA Kit
人腎素(Renin)ELISA檢測試劑盒HumanReninELISAKit 96T/48T
大鼠*24S-羥化酶(CYP46)免疫試劑盒 Rat cholesterol 24-hydroxylase,CYP46 ELISA Kit
CLIAKitforTRANCE(HumanTNFrelatedactivationinducedcytokine)ELISAKit人腫瘤壞死因子相關(guān)激活誘導(dǎo)因子規(guī)格:48T/96T
氣生蘭(epiphytic)移植維護(hù)培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑
ELISAKitHBcAb-IgM人抗乙型肝炎病毒核心IgM抗體規(guī)格:48T/96T
人脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human tumor markers (CA724) ELISA Kit 人標(biāo)志物(CA724)ELISA試劑盒
HumanCaspase3,Casp-3ELISAKit 人胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanImmuneRNA,IrnaELISA試劑盒人免疫核糖核酸(Irna)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-1)活性比色法定量檢測試劑盒20次
HumanLeukotrieneB4,LT-B4ELISAKit人白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
*蛋白激酶抑制劑500mg免費(fèi)代測大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠活性氧簇(ROS)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠活化素A(Activin-A)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原
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