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酵母膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T售后服務實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
酵母膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T售后服務注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
NRG1 Protein Human 重組人 NRG1-beta 1 蛋白 (ECD)
大鼠肺大靜脈內皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
CLEC10A Others Human 人 CLEC10A / MGL1 / CD301 人細胞裂解液 (陽性對照)
TOV21G人卵巢癌細胞 Human ovarian cancer cell line TOV21G 1640+10FBS%
小氣道上皮細胞培養(yǎng)基SAEpiCM
MX-1(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 腮腺細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
人海馬趾星形膠質細胞cDNAHA-h cDNA
CSF2 Others Mouse 小鼠 GM-CSF / CSF2 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠黑色素瘤細胞;B16-F1
Hep3B2.1-7細胞,人肝癌細胞 人髓母細胞瘤細胞,D341Med細胞 中國倉鼠卵巢細胞;CTLA4 Ig-24
NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L](小鼠成纖維 5×106cells/瓶×2
Promocell C-28014 Mesenchymal Stem CellChondrogenic Diff. Medium w/o, 間充質干細胞軟骨分化培養(yǎng)基無誘導劑(即用型) 100ml
HAVCR2 Others Mouse 小鼠 TIM3 / HAVCR2 人細胞裂解液 (陽性對照)
人星形膠質細胞總RNAHA tRNA
黑化大家鼠肺成纖維細胞;NRm
CRL細胞,人胰腺癌細胞 人舌癌細胞,Tca-8113細胞 小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-A5
IMR-32(人神經母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-21060 Airway Epithelial Cell GrowthMedium, 呼吸道上皮細胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml
大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人腎素前體免疫試劑盒 Human renin precursor ELISA kit
Mouseglutamicaciddecarboxylaseautoantibody,GAD-AbELISAKit小鼠*脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
swinemajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/SLAⅡELISA試劑盒豬主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHCⅡ/SLAⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanMatrixmetalloproteinase2/GelatinaseA,MMP-2ELISA試劑盒人基質金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
humanphospholipidscramblase1,PLSCR1ELISAKit人磷脂爬行酶1(PLSCR1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人脂多糖/內毒素(LPS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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Humaniduronatesulfatase,IDSELISA試劑盒人艾杜糖酯酶(IDS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織基質金屬蛋白酶(MMP)總活性比色法定量檢測試劑盒20次
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酵母膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T售后服務大鼠基質金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠基質金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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