我司酵母膜蛋白提取試劑盒（2D電泳用）100T實驗方法本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽*的宗旨，為客戶提供輕松便捷，安全可靠的網(wǎng)上采購模式！我們將竭誠為您服務(wù),咨詢！
酵母膜蛋白提取試劑盒（2D電泳用）100T實驗方法實驗操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對于細(xì)胞懸液每50～100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中，稀釋至10uM ，處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失，JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光；而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞，CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞：
（1）取 10～60 萬細(xì)胞，重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中，細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結(jié)束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細(xì)胞。棄上清，注意盡量不要吸除細(xì)胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計檢測或流式細(xì)胞儀分析。
酵母膜蛋白提取試劑盒（2D電泳用）100T實驗方法注意事項
（1）本試劑只適用于實驗，不適用于臨床檢測；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用，使用時需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時，盡可能在暗處進行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（4）整個操作過程動作要盡量輕柔，勿用力吹打細(xì)胞，盡量在4℃下操作，以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
（5）在細(xì)胞洗滌的后一步，請盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會影響實驗結(jié)果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
（7）PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
BTC Protein Human 重組人 BTC / Betacellulin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

大鼠肺動脈成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

CANT1 Others Human 人 CANT1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

ROS1728 大鼠成骨細(xì)胞 Osteoblasts of ROS1728 rats EMEM +10 FBS

上皮細(xì)胞培養(yǎng)基MEpiCM

MV3(人黑色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
T-104BII型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL

CSF2 Others Rat 大鼠 GM-CSF / CSF2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

星形細(xì)胞生長添加物AGS

TE 354.T細(xì)胞，人皮膚基底細(xì)胞癌 人胚腎細(xì)胞,AAV-293細(xì)胞 原代單核細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml

盤羊皮膚細(xì)胞;ASHS3

S100A1 Others Human 人 S100A1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
HBEGF Others Human 人 HBEGF / DTR 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人星形膠質(zhì)細(xì)胞裂解物HAL

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;SW620 [SW 620;SW-620]

HCC 94[HCC941122]細(xì)胞，子宮鱗癌細(xì)胞(高分化) 人低分化胃癌細(xì)胞,SGC7901細(xì)胞 豬腎細(xì)胞;PK(15)

tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-2D1

DKK3 Others Mouse 小鼠 Dkk-3 / DKK3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠游離*狀腺原酸(Free-T3)ELISA試劑盒 ，英文名： Free-T3 ELISA Kit

人腎損傷分子1(Kim-1)ELISA檢測試劑盒HumanKidneyinjurymolecule1,Kim-1ELISAKit 96T/48T

大鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(sIL-1RⅡ)免疫試劑盒 Rat soluble interleukin-1 receptor Ⅱ,sIL-1RⅡ ELISA kit

CLIAKitforTdT(Humanterminaldeoxynucleotidyltransferase)ELISAKit人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶規(guī)格：48T/96T

人體HemoglobinERFLP基因分析試劑盒20次

ELISAKitanti-HAV人抗甲型肝炎病毒IgG抗體規(guī)格：48T/96T
人脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human neutrophilic alkaline phosphatase (NAP) ELISA Kit 人中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶(NAP)ELISA試劑盒

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HumanICEprotease-activatingfactor,IRAPELISA試劑盒人ICE蛋白酶激活因子(IRAP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

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