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更新時間:2017-07-10 11:54:36瀏覽次數(shù):179次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網骨組織蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
骨組織蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T使用說明書操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
骨組織蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
EGF Protein Mouse 重組小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白
大鼠肺大動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
HA Others H9N2 甲型流感 H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)
H-4-IL-E 大鼠肝細胞瘤細胞 H-4-IL-E hepatoma cells of rats MEM90%(內2mM Glutamin)+10%胎牛血清,補加非必須氨基酸(100x)
小膠質細胞培養(yǎng)基MM-prf
MuM-2B(人眼脈絡黑色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 臍靜脈內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
人淋巴細胞;1301
CSF2 Others Rat 大鼠 GM-CSF / CSF2 人細胞裂解液 (陽性對照)
CM-H009人支氣管上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
SW480細胞,人結腸癌細胞 人黑色素瘤細胞,MV3細胞 EB病毒轉化的人B淋巴細胞;Mao
HBL-100(人整合SV40基因的上皮細胞) 5×106cells/瓶×2
AZU1 Others Human 人 AZU1 / Azurocidin 1 / HBP 人細胞裂解液 (陽性對照)
SMR3B Others Human 人 SMR3B 人細胞裂解液 (陽性對照)
人星形膠質細胞HA
狗腎細胞隆突型;MDCK superdome
中國倉鼠卵巢細胞;CHO 癌細胞,ZR-75-30細胞 SVP細胞,VERO衍生株
人胚腎細胞;293 [HEK-293]
HA Others H6N1 甲型流感 H6N1 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠亮酸豐富重復LGI家族成員3(LGI3)ELISA試劑盒 ,英文名: LGI3 ELISA Kit
人腎小球組織糖基化終末產物(GTE-AGE)ELISA檢測試劑盒HumanGlomerulartissueextract-advancedglycosylationendproducts,GTE-AGEELISAKit 96T/48T
大鼠血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)免疫試劑盒 Rat plaet-derived growth factor-BB,PDGF-BB ELISA Kit
英文名稱RatHistoneDeacetylaseELISAKit大鼠組織蛋白去乙酰化酶(HD)規(guī)格:96T/48T
鈣離子膜通道內質網利羅丁受體(ryanodinereceptor;RyR)功能熒光檢測試劑盒20次
ELISAKitITGαM/CD11b人整合素αM型規(guī)格:48T/96T
人脂肪甘油三酯酯酶(ATGL)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human midkine (MK) ELISA Kit 人中期因子(MK)ELISA試劑盒
Humannuclearfactor-κBp65,NF-κBp65ELISAKit 人核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
humanhypotheticalproteinLOC677340ELISA試劑盒人假定蛋白LOC677340ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織肌酸激酶同工酶腦型(CK--BB)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20次
Humanlipidperoxlde,LPOELISAKit人過氧化脂質/乳過氧化物酶(LPO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
骨組織蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T使用說明書大鼠甲基化酶(Methylase)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠己糖激酶(HK)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠激動異構酶/細胞分裂素MB(CKMB)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠基質細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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