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更新時(shí)間:2017-07-10 11:53:30瀏覽次數(shù):153次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
胞漿蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T使用說明書實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
胞漿蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T使用說明書注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
(7)PI染色時(shí)間過長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
EGFL6 Protein Human 重組人 EGFL6 / EGF-L6 蛋白 (His 標(biāo)簽)
大鼠支氣管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
EPO Others Mouse 小鼠 Erythropoietin / EPO 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
CV-1細(xì)胞,非洲綠猴腎細(xì)胞 HPAC(人胰腺癌細(xì)胞) CM-H010人小氣道上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
滋養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)基TM-prf
MDA-MB-468(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
CSK Others Human 人 CSK / C-Src kinase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
C57小鼠黑色素瘤瘤株;ME (Me)
WEHI 22.1細(xì)胞,B淋巴細(xì)胞 人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞,HIBEpiC細(xì)胞 CL-0096HCT 116(人結(jié)腸癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞-二氫*還原酶缺陷型;CHO/dhFr-
MCPT1 Others Mouse 小鼠 MCPT1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
CROT Others Human 人 CROT (474 Leu/Val) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人心臟成纖維細(xì)胞總RNAHCF tRNA
敘利亞倉(cāng)鼠肌肉細(xì)胞;GH-M1
SMMC-7721細(xì)胞,肝癌細(xì)胞 人羊膜細(xì)胞系,Wish細(xì)胞 倉(cāng)鼠/小鼠雜交瘤細(xì)胞;145-2C11
雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7E7
HAVCR1 Others Human 人 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
大鼠去乙?;囸I激素(dGHRL)ELISA試劑盒 ,英文名: dGHRL ELISA Kit
人生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因β/黑素瘤生激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)ELISA檢測(cè)試劑盒Humangrowth-regulatedoncogeneβ/melanomagrowthstimulatingactivity,GROβ/MGSAELISAKit 96T/48T
植物(擬南芥)超氧化物歧化酶[錳],線粒體(SODA)免疫試劑盒 Plant(Mouse-ear cress)superoxide dismutase [Mn],mitochondrial(SODA)ELISA kit
CLIAKitforPHC(Humanprimaryhepaticcarcinoma)ELISAKit人肝癌抗原規(guī)格:48T/96T
食物阿斯巴塘(aspartame)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitCCK-8人膽囊收縮素/縮膽囊素八肽規(guī)格:48T/96T
人脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白(aFABP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human adiponectin (ADP) ELISA Kit 人脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒
HumanCalfintestinalalkalinephosphatase,CIAPELISAKit 人牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanHydroxy-Pyridiniumcrosslinks,OH-PYDELISA試劑盒人羥基膠原吡啶交聯(lián)(OH-PYD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織肌酸激酶同工酶肌肉型(CK-MM)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒25次
Humanlipocalin2,LCN2ELISAKit人脂質(zhì)運(yùn)載蛋白2(LCN2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
胞漿蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T使用說明書大鼠堿性磷酸酶(ALP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠堿性磷酸酶(AKP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子9(bFGF-9)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子6(bFGF-6)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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