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聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
高爾基體蛋白提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法NRG1 Protein Canine 重組狗 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, His 標(biāo)簽)
大鼠氣管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CA9 Others Canine 狗 Carbonic Anhydrase IX / CA9 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
F81細(xì)胞,貓腎細(xì)胞 NCI-H838 [H838](人肺癌細(xì)胞) 散鱗鏡鯉尾鰭細(xì)胞;YZ21
神經(jīng)元生長添加物NGS
MA-891(小鼠癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 腦成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
高爾基體蛋白提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
高爾基體蛋白提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
高爾基體蛋白提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長,否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞;SMC
CSK Others Mouse 小鼠 CSK / C-Src kinase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
蚊子幼蟲體細(xì)胞;Aedes albopictus clone C6/36 人肺癌細(xì)胞,NCI-H1299細(xì)胞 A-431(表皮癌細(xì)胞)
人低分化肺腺癌細(xì)胞;GLC-82 [GLC82]
ENG Others Human 人 Endoglin / CD105 / ENG 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠腎臟管狀上皮細(xì)胞(RRTEpiC)(5×105)
人心臟成纖維細(xì)胞-心室RNAHCF-av miRNA5 μg
水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S1
艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich 小鼠腎小管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
人羊膜上皮細(xì)胞 Human
EFNB1 Others Mouse 小鼠 EFNB1 / Ephrin-B1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠免疫球蛋白M(IgM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人生長分化因子15(GDF15)免疫試劑盒 Human growth differentiation factor 15,GDF15 ELISA Kit
Mouseglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit小鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
SheepPhosphorylatedadenosinemonophosphateactivatedproteinkinase,AMPKELISA試劑盒綿羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanMatrixmetalloproteinase1,MMP-1ELISA試劑盒人基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanphosphoinositide-specificphospholipaseC,PIPLCELISAKit人磷酯酰肌醇特異性磷酯酶C(PIPLC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人脂聯(lián)素(ADP/ADPN)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human lipase (Lipase) ELISA Kit 人脂肪酶(Lipase)ELISA試劑盒
HumanSuperOxidaseDimutase,SODELISAKit 人超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanhydroxyproline,HypELISA試劑盒人羥*(Hyp)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織肌酸激酶同工酶混合型(CK-MB)活性比色法定量檢測試劑盒25次
HumanLipopolysaccharides,LPSELISAKit人脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
高爾基體蛋白提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法大鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠角化細(xì)胞生長因子(KGF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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