溶酶體蛋白提取試劑盒50T免費(fèi)代測(cè)使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
溶酶體蛋白提取試劑盒50T免費(fèi)代測(cè)操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō)，也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
溶酶體蛋白提取試劑盒50T免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
NRG1 Protein Canine 重組狗 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, Fc 標(biāo)簽)

大鼠氣管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

CA9 Others Canine 狗 Carbonic Anhydrase IX / CA9 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CRFK細(xì)胞，貓腎細(xì)胞 SK-HEP-1(人肝癌細(xì)胞) 獼猴肺細(xì)胞;MML2

角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)添加物KGS

M14(人黑色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 顱蓋造骨細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
心肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 ×105次方(1ml)

CSNK1A1 Others Human 人 CSNK1A1 / CKI-alpha / CK1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞;PC-12 [PC12]

MDA-MB-231細(xì)胞，癌細(xì)胞 人肝癌細(xì)胞,Bel-7402細(xì)胞 CL-00086T-CEM (人T細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

倉(cāng)鼠源細(xì)胞

CDH8 Others Human 人 Cadherin-8 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
CD276 Others Mouse 小鼠 B7-H3 / CD276 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人心臟成纖維細(xì)胞-心房裂解物HCF-aa L

小鼠單核巨噬細(xì)胞;J774A.1

tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類(lèi));F9-CAG-tTA-1A3 IV型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL

AGS人胃腺癌細(xì)胞 Human

TNFRSF1B Others Mouse 小鼠 TNFRSF1B / TNFR2 / CD120b 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
大鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人生長(zhǎng)分化因子2(GDF2)免疫試劑盒 human growth differentiation factor 2,GDF2 ELISA Kit

Mouseghcagons-likepepfide1,GLP-1ELISAKit小鼠胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Sheepmajorhistocompatibilitycomplex,MHCELISA試劑盒綿羊主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanMatrixGlaProtein,MGPELISA試劑盒人基質(zhì)γ羧基*蛋白(MGP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

humanphospho-inhibitorysubunitofNF-κBα,pIKBαELISAKit人磷酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人脂磷壁酸(LTA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human adipose differentiation related protein (ADRP) ELISA Kit 人脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)ELISA試劑盒

HumanHeatShockProteinglycoprotein96,HSPgp96ELISAKit 人熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanhydroxylysine,HylELISA試劑盒人羥賴(lài)氨酸(Hyl)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織肌酸激酶(CK)總活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

Humanlipoproteinlipase，LPLELISAKit人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
溶酶體蛋白提取試劑盒50T免費(fèi)代測(cè)大鼠解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(CNTF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝