溶酶體蛋白提取試劑盒100T使用說明書使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
溶酶體蛋白提取試劑盒100T使用說明書操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
溶酶體蛋白提取試劑盒100T使用說明書實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過長，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
TGFA Protein Human 重組人 TGFA / TGF-alpha 蛋白

大鼠Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

EPHA4 Others Rat 大鼠 EphA4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

C8-D1A細(xì)胞，鼠小腦細(xì)胞 NCI-H1755 [H1755](人肺癌細(xì)胞) 恒河猴肺細(xì)胞;RM-L1

扁桃體上皮細(xì)胞生長添加物TEpiCGS

M1(小鼠白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 淋巴成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
UM-UC-3, 人膀胱移行細(xì)胞癌

CSNK1G1 Others Human 人 CSNK1G1 / CKI-gamma 1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株(HEK293);APP-PS1

RKO細(xì)胞，結(jié)腸腺癌細(xì)胞 人鼻咽癌細(xì)胞系,SUME-a細(xì)胞 CL-0371K7M2 wt(小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 cDNA

IL34 Others Mouse 小鼠 IL-34 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
EPHA3 Others Rat 大鼠 EphA3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人心臟成纖維細(xì)胞-心房HCF-aa

非洲綠猴腎細(xì)胞;CV-1

大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(高分化);PC-12(高分化) 肺扁平上皮癌細(xì)胞，QG-56細(xì)胞 E14細(xì)胞，129小鼠ES細(xì)胞

KM3, 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞 Human

CLEC4D Others Human 人 CLEC4D / CLECSF8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素(MIS/AMH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人生長分化因子3(GDF3/UNQ222/PRO248)免疫試劑盒 Human Growth/differentiation factor 3 ELISA kit

MouseGelsolinELISAKit小鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

SheepInterleukin-2receptor,IL-2RELISA試劑盒綿羊白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Humanmatrixextracellularphosphoglycoprotein,MEPEELISA試劑盒人細(xì)胞外基質(zhì)磷酸糖蛋白(MEPE)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Humanphosphoglyceratemutase2,PGAM2ELISAKit人磷酸甘油酸變位酶2(PGAM2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人脂氧素A4(LXA4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human lipopolysaccharide binding protein (LBP) ELISA Kit 人脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISA試劑盒

Humanhypoxia-induciblefactor1α,HIF-1αELISAKit 人低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanhydroxylysine,HylELISA試劑盒人8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織肌酸激酶(CK)總活性比色法定量檢測試劑盒25次

Humanlipoproteinα，Lp-αELISAKit人脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
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