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聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
組織蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)100T免費(fèi)代測EFNA3 Protein Human 重組人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
人脈絡(luò)膜微血管細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
IL21R Others Rat 大鼠 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
S180細(xì)胞,小鼠艾氏腹水瘤細(xì)胞TCM15 MCF-7(人癌細(xì)胞) 猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細(xì)胞;RF/6A
胎牛血清FBS
HELF(人胚肺成纖維細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 骨細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
組織蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)100T免費(fèi)代測使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
組織蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)100T免費(fèi)代測操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
組織蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)100T免費(fèi)代測實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長,否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
家兔腎細(xì)胞;RABK3
CSNK2A1 Others Mouse 小鼠 CSNK2A1 / CK2A1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CL-0129Jurkat, Clone E6-1 (人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
AGS人胃腺癌細(xì)胞 結(jié)腸癌細(xì)胞,CoLo 320DM細(xì)胞 Saos-2(成骨肉瘤細(xì)胞)
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H23
CD200R1 Others Human 人 CD200R1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
XRCC5 & XRCC6 Others Human 人 XRCC5 & XRCC6 Heterodimer 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人心肌細(xì)胞裂解物HCML
小鼠癌細(xì)胞;CCC-Ca761-03
NIH:OVCAR-3細(xì)胞,卵巢癌細(xì)胞 人食管癌細(xì)胞,KYSR450細(xì)胞 豚鼠皮膚細(xì)胞;GP-S2
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);F9-CAG-tTA-3A1
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/1194/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠內(nèi)毒素(ET)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人生長激素結(jié)合蛋白(GHBP)免疫試劑盒 Human Growth Hormone Binding Protein,GHBP ELISA Kit
MouseGamma-aminobutyricacid,GABAELISAKit小鼠γ氨基丁酸(GABA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
SheepInterleukin1β,IL-1βELISA試劑盒綿羊白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanMannose,MNELISA試劑盒人甘露糖(MN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanphospho-extracellularsignal-regulatedkinase,pERKELISAKit人磷酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human lipoprotein alpha (Lp- alpha) ELISA Kit 人脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒
Humanproliferatingcellnuclearantigenantibody,PCNAELISAKit 人抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanHya]uronatebindingprotein,HABPELISA試劑盒人透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織活化*10(FACTORXa)活性熒光定量檢測試劑盒20次
HumanlisteriolysinO,LLOELISAKit人單核細(xì)胞增多性李斯特菌素O((LLO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)100T免費(fèi)代測大鼠抗*Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠抗利尿激素/血管加壓素/精酸加壓素(ADH/VP/AVP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠抗酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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