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更新時間:2017-07-10 11:49:46瀏覽次數(shù):124次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)細(xì)胞蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)100T售后服務(wù)使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
細(xì)胞蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)100T售后服務(wù)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
細(xì)胞蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)100T售后服務(wù)實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
EFNA1 Protein Human 重組人 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
人視網(wǎng)膜muller細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
IL13RA2 Others Rat 大鼠 IL13RA2 / IL13R 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
GH3細(xì)胞,大鼠埀體瘤細(xì)胞 5637(人膀胱癌細(xì)胞) 非洲綠猴腎細(xì)胞;Vero E6
細(xì)胞培養(yǎng)超純水CCGW
HCCLM3(人高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 肝竇內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
臍帶單核細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
CSNK2A2 Others Human 人 CSNK2A2 / CK2A2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
小鼠淋巴瘤細(xì)胞;P388D1(IL-1)
H9c2細(xì)胞,大鼠心肌細(xì)胞 人肝癌細(xì)胞,HepG2/2-15細(xì)胞 CL-0128JeKo-1(人套細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
二氫*還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CHO/dhFr-
CD38 Others Human 人 CD38 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CD38 Others Cynomolgus 食蟹猴 SCARB3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人心肌細(xì)胞-心房總RNAHCF-aa tRNA
人大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
Ana-1細(xì)胞,小鼠巨噬細(xì)胞 WEHI 22.1(B淋巴細(xì)胞) 小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;SH2
CSF3R Protein Human 重組人 G-CSFR / CD114 / CSF3R 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
TM3(小鼠間質(zhì)細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠肝癌細(xì)胞;Hepa 1-6 [Hepa1-6]
大鼠內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人生長激素釋放多肽(GHRP)免疫試劑盒 Human Growth Hormone Releasing Peptide,GHRP ELISA Kit
MouseFreeTri-iodothyronineIndes,Free-T3ELISAKit小鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
SheepInterleukin1,IL-1ELISA試劑盒綿羊白介素1(IL-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanmannosereceptor,MRELISA試劑盒人甘露糖受體(MR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanphosphoenolpyruvatecarboxykinase,PCKELISAKit人磷酸烯醇式丙同酸羧激酶(PCK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人標(biāo)志物(CA724)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Expression of human normal T cells and secreted factor (RANTES/CCL5) ELISA Kit 人正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA試劑盒
HumanHeatShockProtein90,HSP-90ELISAKit 人熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanH-rasELISA試劑盒人H-rasELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織氧化酶活性熒光定量檢測試劑盒20次
Humanliverspecificlipoprotein,LSPELISAKit人抗肝特異性脂蛋白抗體(LSP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
細(xì)胞蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)100T售后服務(wù)大鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠抗*(AT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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