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組織蛋白快速提取試劑盒(離心柱法)50T實驗方法

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更新時間:2017-07-10 11:49:27瀏覽次數(shù):212次

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組織蛋白快速提取試劑盒(離心柱法)50T實驗方法注意事項
1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
7PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
組織蛋白快速提取試劑盒(離心柱法)50T實驗方法實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
1)取 1060 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
我司組織蛋白快速提取試劑盒(離心柱法)50T實驗方法本著標準*、質(zhì)量*、服務*、信譽*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務,咨詢!
EFNA5 Protein Human 重組人 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (His 標簽)

人小梁網(wǎng)細胞*培養(yǎng)基 100mL

CLMP Others Rat 大鼠 ASAM / CLMP 人細胞裂解液 (陽性對照)

CMT93細胞,小鼠結腸癌細胞 NCL-H460(非小細胞肺癌) 水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S4

I 型膠原細胞檢測試劑盒Col

HCC94(人子宮鱗癌細胞(高分化)) 5×106cells/瓶×2 肝動脈內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
髓核細胞培養(yǎng)基NPCM

CST1 Others Human CST1 / Cystatin-1 / Cystatin-SN 人細胞裂解液 (陽性對照)

GPH4 豚鼠心肌來源細胞

CM-M014小鼠氣管和支氣管上皮細胞*培養(yǎng)基100mL

3T3-L1, 小鼠前脂肪細胞

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0909 人軟骨細胞*培養(yǎng)基 100mL
HEPACAM2 Others Rat 大鼠 HepaCAM2 人細胞裂解液 (陽性對照)

人心肌細胞-RNAHCM-a miRNA5 μg

人心肌成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL

PC-12細胞,大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化) HT-29(結腸癌細胞) 人子宮內(nèi)膜腺癌細胞;HEC-1-B

CXCL12 Protein Human 重組人 CXCL12 / SDF1b 蛋白 (Fc 標簽)

SVEC4-10(小鼠淋巴結內(nèi)皮細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CCL2 / MCP-1 / MCP1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠主要組織相容性復合體Ⅰ類(MHC/AgB/H-1)ELISA試劑盒 ,英文名: MHC/AgB/H-1 ELISA Kit

人生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA檢測試劑盒Humangrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin,GHRP-GhrelinELISAKit 96T/48T

大鼠雌二醇(E2)抗體免疫試劑盒 Rat Estradiol(E2)antibody ELISA Kit

CLIAKitforTPA(HumanTissuePolypeptideAntigen)ELISAKit人組織多肽抗原規(guī)格:48T/96T

全血線粒體DNA萃取試劑盒10/20

ELISAKitGP人抗糖蛋白抗體規(guī)格:48T/96T
人壞死因子α(TNF-α)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human integrin linked kinase 1 (ILK-1) ELISA Kit 人整合素連接激酶1(ILK-1)ELISA試劑盒

HumanHeatShockProtein70,HSP-70ELISAKit 人熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanhormonesensitivelipase,HSLELISA試劑盒人激素敏感性脂肪酶(HSL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

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HumanL-LactateDehydrogenaseL-LDHELISAKitL-乳酸脫氫酶(L-LDH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織蛋白快速提取試劑盒(離心柱法)50T實驗方法大鼠顆粒酶B(Gzms-B)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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