當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>蛋白提取/檢測>> 線粒體蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T實(shí)驗(yàn)方法
參 考 價(jià) | 面議 |
產(chǎn)品型號
品 牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
聯(lián)系方式:陳經(jīng)理查看聯(lián)系方式
更新時(shí)間:2017-07-10 11:48:24瀏覽次數(shù):114次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
線粒體蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
線粒體蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
線粒體蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
EFNB2 Protein Human 重組人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
人角膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CD47 Others Rat 大鼠 CD47 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
HPT-8細(xì)胞,小鼠飼養(yǎng)層上皮細(xì)胞 293(轉(zhuǎn)染腺病毒E1A基因的人腎上皮細(xì)胞) 長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細(xì)胞;201184
人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞裂解物HBMECL
EA.hy926(人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大隱靜脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
肝竇內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
CST9L Others Human 人 CST9L / Testatin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠骨骼肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
208F大鼠成纖維細(xì)胞 208F rat fibroblasts 大鼠成纖維細(xì)胞
IFNA8 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Interferon alpha-B / IFNA8 蛋白 (His 標(biāo)簽)
IAR20(大鼠肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 啤酒酵母
TNFRSF1B Others Cynomolgus 食蟹猴 TNFR2 / CD120b / TNFRSF1B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H446
人胃粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
MFC細(xì)胞,小鼠胃癌細(xì)胞 BHK(幼倉鼠腎細(xì)胞) 獼猴肺細(xì)胞;MML2
XCL1 Protein Mouse 重組小鼠 XCL1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
RBE(人膽管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 IFNA5 / IFNaG 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
小鼠2',5'-寡腺苷酸合成酶1(OAS1)ELISA試劑盒 ,英文名: OAS1 ELISA Kit
人*(SS)ELISA檢測試劑盒HumanSomatostatin,SSELISAKit 96T/48T
大鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)免疫試劑盒 Rat hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α ELISA Kit
CLIAKitforTSGF(HumanTumorSpecificGrowthFacter/tumorsuppliedgroupoffactor)ELISAKit人腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子規(guī)格:48T/96T
胚胎干細(xì)胞外胚層(ectoderm)細(xì)胞分化熒光檢測試劑盒10次
ELISAKitCoxV-IgM人柯薩奇病毒IgM規(guī)格:48T/96T
人壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human mucin / mucin 5B (MUC5B) ELISA Kit 人粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA試劑盒
HumanCyclin-D2ELISAKit 人細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanHistoneDeacetylase,HDELISA試劑盒人組織蛋白去乙?;?/span>(HD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織環(huán)氧化酶(CYCLOOXYGENASE-1)活性熒光定量檢測試劑盒20次
Humanlowmolecular-weightprotein/proteasomebeta-typesubunit,LMP7/PSMB9ELISAKit人低分子質(zhì)量蛋白7/β型蛋白酶體9(LMP7/PSMB9)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
線粒體蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T實(shí)驗(yàn)方法大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠醌氧化還原酶1(NQ01)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠細(xì)胞蛋白(CC16)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠可溶性壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sTRAIL)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),儀表網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險(xiǎn),建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。