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真菌膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T實驗方法

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更新時間:2017-07-10 10:23:13瀏覽次數(shù):205次

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真菌膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T實驗方法EFNA5 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (His 標(biāo)簽)

人腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/S1211394/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

BSC-1細(xì)胞,猴腎細(xì)胞系 CHRF(人巨核細(xì)胞白血病) 敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21

人結(jié)膜細(xì)胞裂解物HConFL

BC-022(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠漿細(xì)胞瘤;MPC-11

真菌膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請 離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
真菌膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T實驗方法操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)515min;
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
真菌膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T實驗方法實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細(xì)胞;
3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS4)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細(xì)胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
5Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL1×Binding Buffer。
人導(dǎo)管癌細(xì)胞;ZR-75-1

CTSD Others Human Cathepsin D / CTSD 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

DLD-1 人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞

CMVECs微血管內(nèi)皮細(xì)胞 CMVECs micro vascular endothelial cells DMEM+10%FBS

TNFSF12 Protein Rat 重組大鼠 TNFSF12 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

人小梁網(wǎng)細(xì)胞(HTMC)(5×105) 3T3-L1, 小鼠前脂肪細(xì)胞 Mouse
PARP3 Others Human PARP-3 / PARP3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人小腦顆粒細(xì)胞總RNAHCGC tRNA

大鼠骨髓瘤細(xì)胞;Y3-Ag 1.2.3

QG-56細(xì)胞,肺扁平上皮癌細(xì)胞 人口腔上皮癌長春新堿耐藥株,KB/V細(xì)胞 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-C2

小鼠腹水瘤細(xì)胞;S-180

IFNGR1 Others Human IFN-gamma R1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
小鼠二肽基肽酶8(DPP8)ELISA試劑盒 ,英文名: DPP8 ELISA Kit

人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤抑制蛋白(pRB)ELISA檢測試劑盒Humanretinoblastomatumorsuppressorprotein,pRBELISAKit 96T/48T

大鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)免疫試劑盒 Rat Prostatic Acid Phosphatase,PAP ELISA Kit

英文名稱Ratanti-thrombinreceptorELISAKit大鼠抗*受體(ATR)規(guī)格:96T/48T

甲酸化學(xué)法石蠟切片抗原修復(fù)處理試劑盒50

人未磷酸化類胰島素生長因子結(jié)合蛋白-1ELISAKit人未磷酸化類胰島素生長因子結(jié)合蛋白-1ELISAKit48T/96T人未磷酸化類胰島素生長因子結(jié)合蛋白-1ELISAKit,48T/96T規(guī)格:48T/96T
人重去甲(NE-B)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human protamine (Protamine) ELISA Kit 人*(Protamine)ELISA試劑盒

HumanSquamousCellCarcinomaAntigen2,SCCAg2ELISAKit 人鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原2(SCCAg-2)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

humanhexokinase3,HK3ELISA試劑盒人己糖激酶3(HK3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織過氧化氫酶(CATALASE)催化活性比色法定量檢測試劑盒20

HumanLymeIgGELISAKit人萊姆IgG(Lyme-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T實驗方法大鼠*受體(TR)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠*抗*復(fù)合物(TAT)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠尿微量白蛋白(ALBELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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