GST標(biāo)簽蛋白純化試劑盒10ml實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
GST標(biāo)簽蛋白純化試劑盒10ml實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
GST標(biāo)簽蛋白純化試劑盒10ml實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過長，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
EFNB1 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

人破骨細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

ERBB3 Others Rat 大鼠 HER3 / ErbB3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

PA317細(xì)胞，小鼠胚成纖維包裝細(xì)胞 6T-CEM(T細(xì)胞白血病) 大鼠腎小球系膜細(xì)胞;HBZY-1

人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞cDNAHPASMC cDNA

A-427(人肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠T淋巴細(xì)胞;Cl.Ly1+2-/9
CL-0383MDA-MB-436(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

CXADR Others Mouse 小鼠 CXADR / CAR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人角膜上皮細(xì)胞總RNAHCEpiC tRNA

ZR75-1細(xì)胞，人癌細(xì)胞 129小鼠ES細(xì)胞,D3細(xì)胞 WM35, 人黑色素瘤細(xì)胞

MV3(人黑色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

HUAEC Pellet 人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)基NM-prf
CD68 Others Rat 大鼠 CD68 / Macrosialin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人小膠質(zhì)細(xì)胞總RNAHM tRNA

人真皮淋巴上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

COS-7細(xì)胞，SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞 293T/17 [HEK 293T/17] (人胚腎細(xì)胞) 雜交瘤(B類);Z1510C6D10F4G6

EFNB2A Protein Danio rerio (zebrafish) 重組斑馬魚 EFNB2A / Ephrin B2a 蛋白 (His 標(biāo)簽)

Vero(非洲綠猴腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1
大鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白(ECP)免疫試劑盒 Human eosinophil cationic protein,ECP ELISA Kit

MouseFMS-liketyrosinekinase3,Flt3ELISAKit小鼠FMS樣*激酶3(Flt3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Ratβ2-glycoprotein1antibodyIgA/G/M,β2-GP1IgA/G/MELISA試劑盒大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1IgA/G/M)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanmajorhistocompatibilitycomplexⅢ,MHCⅢ/HLA-ⅢELISA試劑盒人主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Humanpermeabilityglycoprotein,P-gpELISAKit人P糖蛋白/滲透性糖蛋白(P-gp)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human free testosterone (F-TESTO) ELISA Kit 人游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒

Humancarcinoembryonicantign,CEAELISAKit 人癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

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組織*還原酶活性比色法定量檢測試劑盒20次

HumanLysozyme，LZMELISAKit人*(LZM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
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大鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝