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更新時間:2017-07-10 10:19:35瀏覽次數(shù):157次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)藻類膜蛋白提取試劑盒(2D電泳)100T使用說明書實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
藻類膜蛋白提取試劑盒(2D電泳)100T使用說明書注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
EFNA5 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標簽)
人軟骨細胞*培養(yǎng)基 100mL
CXCL16 Others Rat 大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 人細胞裂解液 (陽性對照)
L929細胞,小鼠肺成纖維細胞 SGC7901(胃腺癌細胞) 大鼠腦膠質(zhì)瘤細胞;C6
人腎系膜細胞cDNAHRMC cDNA
801-D (人巨細胞性肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 倉鼠/小鼠雜交瘤細胞;145-2C11
小鼠胚胎成纖維細胞;NIH/3T3
CXCL16 Others Canine 狗 CXCL16 / SR-PSOX 人細胞裂解液 (陽性對照)
Caco-2,人結(jié)直腸腺癌細胞
NEI-H209細胞,小細胞肺癌細胞 人前列腺癌細胞,22RV1細胞 人脈絡(luò)叢成纖維細胞RNAHCPF miRNA5 μg
非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS5B;Vero-HCV-NS5B
ERBB3 Others Human 人 ErbB3 / HER3 人細胞裂解液 (陽性對照)
CLEC7A Others Human 人 CLEC7A / Dectin-1 / CLECSF12 人細胞裂解液 (陽性對照)
人小膠質(zhì)細胞裂解物HML
人胃癌細胞;MKN-45
小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02 透明質(zhì)酸酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL
A549/DDP, 人肺腺癌耐藥細胞株 Human
PLA2G1B Others Human 人 PLA2G1B / PLA2 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠腦啡肽(ENK)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人受體TNFRSF結(jié)合**激酶2(RIPK2)免疫試劑盒 human receptor TNFRSF-interacting serine-threonine kinase 2,RIPK2 ELISA Kit
MouseFibronectin,FNELISAKit小鼠纖連蛋白(FN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Ratα-Glucosidase,a-GluELISA試劑盒大鼠α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanmajorhistocompatibilitycomplexⅠ,MHCⅠ/HLAⅠELISA試劑盒人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/HLAⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanPerforin/Pore-formingprotein,PF/PFPELISAKit人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human free female three alcohol (FE3) ELISA Kit 人游離雌三醇(FE3)ELISA試劑盒
Humanhepaticlipase,HLELISAKit 人肝脂酶(HL)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanHepatitisDvirusIgM,HDVIgMELISA試劑盒人戊型肝炎病毒IgM(HEV-IgM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織*過氧化物酶(GSHPX)活性酶動力比色法定量檢測試劑盒20次
HumanMacrophageColony-StimulatingFactor,M-CSFELISAKit人巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
藻類膜蛋白提取試劑盒(2D電泳)100T使用說明書大鼠神經(jīng)激肽A(NKA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠上皮中性粒細胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠*狀腺原酸(T3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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