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更新時間:2017-07-10 10:18:17瀏覽次數(shù):150次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)血液蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)100T使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
血液蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)100T使用說明書操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
血液蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)100T使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
EFNA5 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (His 標簽)
胎兒真皮成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL
EDA2R Others Rat 大鼠 XEDAR / EDA2R 人細胞裂解液 (陽性對照)
CFSC-3H & 5H細胞,大鼠肝星形細胞 SK-N-SH(神經(jīng)母細胞瘤) 大鼠垂體瘤細胞;GH3
人絨毛間葉成纖維細胞cDNAHVMF cDNA
YAC-1(小鼠淋巴瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠肺腺癌細胞系;LA795
人表皮黑色素細胞-HEM-a
DAPK1 Others Human 人 DAPK1 / DAP Kinase 1 (aa 1-363) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
兔角膜后基質(zhì)層成纖維細胞;RCBBF
Y1細胞,腎上腺皮質(zhì)細胞 人胰腺癌細胞,MIApaca-2細胞 CM-M008小鼠支氣管成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠骨肉瘤細胞;UMR-106
CDH4 Others Human 人 R-Cadherin / CDH4 人細胞裂解液 (陽性對照)
NOV Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV Baculovirus-Insect cells Transfected Lysate (positive control) (denatured)
人無色素睫狀上皮細胞HNPCEpiC
恒河猴腎細胞;LLC-MK2
大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化);PC-12(低分化) 肝癌細胞,BEL-7402細胞 D3細胞,129小鼠ES細胞
MiaPaCa-2, 人胰腺癌細胞 Human
CST4 Others Human 人 CST4 / Cystatin-4 / Cystatin-S 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人瘦素(LEP)免疫試劑盒 Human Leptin,LEP ELISA kit
Mouseferritin,FEELISAKit小鼠鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Ratα1-Acidglycoprotein,α1-AGPELISA試劑盒大鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanMacrophage-DerivedChemokine,MDCELISA試劑盒人巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanPeptidylprolylcis/transisomerase,PPIELISAKit人肽基脯氨酰順反異構(gòu)酶(PPI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人轉(zhuǎn)錄因子抗體-1(ATF-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human euglobulinlysis (EL) ELISA Kit 人優(yōu)球蛋白(EL)ELISA試劑盒
Humanlowmolecularweightheparin,LMWHELISAKit 人低分子肝素(LMWH)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
humanhepatitisBvirus,HBVpreS2AgELISA試劑盒人乙型肝炎病毒前S2抗原(HBVpreS2Ag)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織*(GLUTATHIONE)總濃度熒光定量檢測試劑盒50次
HumanMacrophageInflammatoryProtein-1β,MIP-1βELISAKit人巨噬細胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
血液蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)100T使用說明書大鼠生長因子(GH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠*(SS)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠生長激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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