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更新時間:2017-07-10 10:16:13瀏覽次數(shù):174次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
我司透析袋,截留分子量20KD;直徑6mm;壓平寬度10mm 1卷,5M 免費(fèi)代測本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務(wù),咨詢!
透析袋,截留分子量20KD;直徑6mm;壓平寬度10mm 1卷,5M 免費(fèi)代測實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細(xì)胞儀分析。
透析袋,截留分子量20KD;直徑6mm;壓平寬度10mm 1卷,5M 免費(fèi)代測注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時,盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
EFNB2A Protein Danio rerio (zebrafish) 重組斑馬魚 EFNB2A / Ephrin B2a 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
胎兒表皮角化細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CD24 Others Rat 大鼠 CD24 / Ly-52 / CD24A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
MDCK細(xì)胞,狗腎細(xì)胞 AAV-293( 胚腎細(xì)胞) 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B5
人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞總RNAHOPC tRNA
WI-38(人胚肺細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠癌細(xì)胞;CCC-Ca761-03
CL-0036BRL-3A(大鼠正常肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
DCBLD1 Others Human 人 Discoidin / DCBLD1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
多聚賴氨酸 1 mg/mlPLL
Ovary細(xì)胞,人卵巢癌細(xì)胞 兔成骨C細(xì)胞,IF細(xì)胞 胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
FO(小鼠骨髓瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
HRCEpC Pellet 人腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人晶狀體上皮細(xì)胞cDNAHLEpiC cDNA
IL1R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL1R1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人胃腺癌細(xì)胞;BGC-823
CM-H130人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
MKN-28細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞 人骨肉瘤細(xì)胞,U-2 OS細(xì)胞 幼蚊細(xì)胞;C6/36
DLD-1(人結(jié)腸腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
CA9 Others Human 人 CA9 / CAIX 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒 ,英文名: Cyclin-D3 ELISA Kit
人輸血傳播病毒/辛型肝炎病毒((TTV)ELISA檢測試劑盒humantransfusiontransmittedvirus,TTVELISAKit 96T/48T
大鼠Ⅲ型前膠原氨基末端肽(PⅢNP)免疫試劑盒 Rat N-terminal procollagen Ⅲ propeptide,PⅢNP ELISA Kit
CLIAKitforSAA(RabbitSerumamyloidA)ELISAKit兔血清淀粉樣蛋白A規(guī)格:48T/96T
石蠟切片結(jié)締組織(CONNECTIVETISSUE)馬森(MASSON)染色試劑盒50次
ELISAKitTn-Ⅰ人肌鈣蛋白Ⅰ規(guī)格:48T/96T
人轉(zhuǎn)移生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human inhibin A (INH-A) ELISA Kit 人抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒
Humanheparinassociatedantibody,HIISAKit 人抗肝素PF4復(fù)合物抗體/HIT抗體(HIT)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanhepatitisBvirusXAg,HBxAgELISA試劑盒人乙型肝炎病毒X抗原(HBxAg)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織*酶(glutaminase)活性比色法定量檢測試劑盒20次
HumanMacrophageMigrationInhibitoryFactor,MIFELISAKit人巨噬細(xì)胞移動抑制因子(MIF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
透析袋,截留分子量20KD;直徑6mm;壓平寬度10mm 1卷,5M 免費(fèi)代測大鼠酸性磷酸酶(ACP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠酸性成纖維細(xì)胞生長因子1(aFGF-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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