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更新時(shí)間:2017-07-10 10:13:26瀏覽次數(shù):163次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)核蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T使用說(shuō)明書(shū)
總蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
雙縮脲蛋白定量試劑盒500T使用說(shuō)明書(shū)
透析袋,截留分子量7KD;直徑49mm;壓平寬度77mm 1卷,5M 實(shí)驗(yàn)方法CSF2 Protein Human 重組人 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
人顱蓋造骨細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
JAM2 Others Rat 大鼠 JAM-2 / JAM-B 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
CHO-K1細(xì)胞,中國(guó)倉(cāng)鼠倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞亞株 MC3T3-E1 Subclone 14(小鼠原成骨細(xì)胞) 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞;CT26.WT [CT26WT]
人前列腺成纖維細(xì)胞總RNAHPrF tRNA
U-2 OS(人骨肉瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T6-Swiss albino
透析袋,截留分子量7KD;直徑49mm;壓平寬度77mm 1卷,5M 實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng) 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
透析袋,截留分子量7KD;直徑49mm;壓平寬度77mm 1卷,5M 實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō),也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
透析袋,截留分子量7KD;直徑49mm;壓平寬度77mm 1卷,5M 實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2F8
DDR1 Others Mouse 小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
LLC 小鼠肺癌細(xì)胞
HBL-100人整合SV40基因的上皮細(xì)胞 HBL-100 integration of SV40 gene in breast epithelial cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
SHH Protein Human 重組人 SHH / Sonic hedgehog 蛋白 (aa 1-197, His 標(biāo)簽)
人成纖維細(xì)胞;HFF Hepa 1-6, 小鼠肝癌細(xì)胞 Mouse
EGF Others Mouse 小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞;D341Med
MGC-803 人胃癌細(xì)胞
NCI-H1395人肺腺癌細(xì)胞 Human lung adenocarcinoma cell line NCI-H1395 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
FAM3D Protein Human 重組人 FAM3D 蛋白 (His 標(biāo)簽)
293來(lái)源病毒包裝細(xì)胞;ΦA 人上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGFR-2 ELISA Kit
人水痘帶狀皰疹病毒IgG(VZV-IgG)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanVaricellazostervirusIgG,VZV-IgGELISAKit 96T/48T
大鼠C型鈉尿肽(CNP)免疫試劑盒 Rat C-type natriuretic peptide,CNP ELISA Kit
CLIAKitforsICAM-1ELISAKit大鼠可溶性細(xì)胞間粘附分子1規(guī)格:48T/96T
腎素化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitTHAA人甲狀腺非肽激素抗體規(guī)格:48T/96T
人總前列腺特異抗原(tPSA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human abnormal prothrombin (APT) ELISA Kit 人異常*原(APT)ELISA試劑盒
HumanHyaluronicacid,HAELISAKit 人透明質(zhì)酸(HA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanHeparanase,HPAELISA試劑盒人乙酰肝素酶(HPA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織甘油三酯(triglyceride)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
Humanmalondialchehyche,MDAELISAKit人丙二醛(MDA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
透析袋,截留分子量7KD;直徑49mm;壓平寬度77mm 1卷,5M 實(shí)驗(yàn)方法大鼠維生素A(VA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠網(wǎng)膜素(omentin)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原
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