當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>蛋白提取/檢測>> 透析袋,截留分子量50KD;直徑16mm;壓平寬度25mm 1卷,5M 使用說明書
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更新時間:2017-07-10 10:12:47瀏覽次數(shù):212次
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1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
透析袋,截留分子量50KD;直徑16mm;壓平寬度25mm 1卷,5M 使用說明書操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
透析袋,截留分子量50KD;直徑16mm;壓平寬度25mm 1卷,5M 使用說明書實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
CSF3R Protein Human 重組人 G-CSFR / CD114 / CSF3R 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
人大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CD38 Others Cynomolgus 食蟹猴 SCARB3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
Ana-1細(xì)胞,小鼠巨噬細(xì)胞 WEHI 22.1(B淋巴細(xì)胞) 小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;SH2
人心肌細(xì)胞-心房總RNAHCF-aa tRNA
TM3(小鼠間質(zhì)細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠肝癌細(xì)胞;Hepa 1-6 [Hepa1-6]
CM-H033人腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
DDR1 Others Rat 大鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人腦血管平滑肌細(xì)胞HBVSMC
HEL細(xì)胞,人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞 小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化),M-1細(xì)胞 成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基FM-acf
MFC-GFP(小鼠前胃癌細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記)) 5×106cells/瓶×2
B16(小鼠黑色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R107大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0920
REG1A Others Cynomolgus 食蟹猴 REG1A / PSPS 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人髓核細(xì)胞總RNAHNPC tRNA
中國倉鼠肺細(xì)胞;CHL
BxPC-3細(xì)胞,人原位胰腺腺癌細(xì)胞 人皮膚纖維微細(xì)胞系,Malmc細(xì)胞 小鼠漿細(xì)胞瘤;MPC-11
HT-1080(人纖維肉瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
Gibco 17104019 Collagenase Type IV 1g
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGFR-1/Flt1 ELISA Kit
人水痘帶狀皰疹病毒IgM(VZV-IgM)ELISA檢測試劑盒HumanVaricellazostervirusIgM,VZVIgMELISAKit 96T/48T
大鼠C肽(C-Peptide)免疫試劑盒 Rat C-Peptide ELISA Kit
CLIAKitforsHLA-G(HumansolublehumanleucocyteantigenG1)ELISAKit人可溶性白細(xì)胞抗原G規(guī)格:48T/96T
腎組織固著液(BUBOSCQ-BRAZIL固著液)50毫升
ELISAKitTSI人甲狀腺刺激免疫球蛋白規(guī)格:48T/96T
人足細(xì)胞標(biāo)記蛋白(PCX)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat lipolysaccharide binding protein (LBP) ELISA Kit 大鼠脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISA試劑盒
HumanCollagenTypeⅢ,ColⅢELISAKIT 人Ⅲ型膠原(ColⅢ)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanHemolyticcomplement,HcELISA試劑盒人溶血補(bǔ)體(Hc)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織甘油激酶(Glycerolkinase)活性酶連續(xù)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒20次
HumanmammarycarcinomaMarker-CA153ELISAKit人癌標(biāo)志物-CA153ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
透析袋,截留分子量50KD;直徑16mm;壓平寬度25mm 1卷,5M 使用說明書大鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠尾加壓素II(UrotensinII)ELISA試劑盒 96T/48T ELISA試劑盒 組裝/原裝
大鼠維生素K1(VK1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠維生素E(VE)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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