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更新時(shí)間:2017-07-10 10:10:13瀏覽次數(shù):155次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
透析袋,截留分子量3.5KD;直徑28mm;壓平寬度44mm 1卷,5M 售后服務(wù)使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
透析袋,截留分子量3.5KD;直徑28mm;壓平寬度44mm 1卷,5M 售后服務(wù)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
透析袋,截留分子量3.5KD;直徑28mm;壓平寬度44mm 1卷,5M 售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
CSF2 Protein Mouse 重組小鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
人大隱靜脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
LMAN2L Others Human 人 LMAN2L 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
Mo-MuLV/3T3細(xì)胞,小鼠Mo-MuLv感染的3T3細(xì)胞 T/G HA-VSMC(人主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞) 人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞;NCI-H2087
人小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞RNAHA-c miRNA5 μg
T84(人結(jié)腸腺癌肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠淋巴瘤細(xì)胞(NK靶細(xì)胞);YAC-1
人胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17
DDR2 Others Human 人 DDR2 Kinase / CD167b (aa 422-855) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
CL-0355HFT-8810(人胎兒胸腺細(xì)胞株)5×106cells/瓶×2
CHO, 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞系 人T細(xì)胞淋巴瘤,Jurkat E6-1細(xì)胞 THLE-3(人肝上皮細(xì)胞)
人胰腺癌細(xì)胞;AsPC-1
VSIG4 Others Mouse 小鼠 VSIG4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
EPO Others Rat 大鼠 Erythropoietin / EPO 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞HRPEpiC
非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO
QSG-7701細(xì)胞,肝細(xì)胞 人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞,DLD-1細(xì)胞 CM-R053大鼠卵巢上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞;C6
CSF2RA Others Human 人 GM-CSFR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
小鼠*過氧化酶1(GPX1)ELISA試劑盒 ,英文名: GPX1 ELISA Kit
人水通道蛋白3(AQP-3)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanAquaporin3,AQP-3ELISAKit 96T/48T
大鼠水通道蛋白4(AQP-4)免疫試劑盒 Rat Aquaporin 4,AQP-4 ELISA Kit
英文名稱Ratβ-HCGELISAKit大鼠絨毛膜*β(β-HCG)規(guī)格:96T/48T
活化*11(FACTORXIa)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitNN-T4人新生甲狀腺素規(guī)格:48T/96T
人組織蛋白酶K(cath-K)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human hepatitis B virus X antigen (HBxAg) ELISA Kit 人乙型肝炎病毒X抗原(HBxAg)ELISA試劑盒
Humananti-hepatitisBviruscoreantibody,HBcAbELISAKit 人抗乙型肝炎病毒核心抗體(HBcAb)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanhemeoxygenase2,HO-2ELISA試劑盒人血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒20次
HumanMannose,MNELISAKit人甘露糖(MN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
透析袋,截留分子量3.5KD;直徑28mm;壓平寬度44mm 1卷,5M 售后服務(wù)大鼠心肌營(yíng)養(yǎng)素1(CT-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠心肌特異性肌鈣蛋白T(C)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠心肌肌鈣蛋白Is(cTnI)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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