his標(biāo)簽蛋白純化試劑盒5ml實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
his標(biāo)簽蛋白純化試劑盒5ml實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō)，也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
his標(biāo)簽蛋白純化試劑盒5ml實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
CSF2 Protein Mouse 重組小鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

VASN Others Human 人 VASN / Vasorin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

3T3細(xì)胞，小鼠成纖維細(xì)胞 COLO 205(結(jié)腸癌細(xì)胞) 人腎透明細(xì)胞癌;Caki-1

人表皮黑色素細(xì)胞-淺色素RNAHEM-l miRNA5 μg

T-47D(人管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H9N2 (A/Hong Kong/1073/99) 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

DDR2 Others Human 人 DDR2 Kinase / CD167b 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

雜交瘤(B類(lèi));Z1510A2G6A2C7

GLC-82細(xì)胞，人肺腺癌細(xì)胞 轉(zhuǎn)S9基因倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞,ZA6細(xì)胞 CL-0050Caco-2(人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

SV-HUC-1(人膀胱上皮永生化細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

HCAEC-c 人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞(HCAEC) 500,000cells 滑膜細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
TNFRSF1A Others Rat 大鼠 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞cDNAHRPEpiC cDNA

真皮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

WB-F344細(xì)胞，大鼠肝上皮樣干細(xì)胞 HL-60(白血病原髓細(xì)胞) 大鼠肝細(xì)胞瘤;H4-II-E-C3

EFNA1 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

ZR-75-1(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 C3H/An小鼠結(jié)締組織細(xì)胞(L929-TK-);LTK-
大鼠*型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人水通道蛋白3(AQP-3)免疫試劑盒 Human Aquaporin 3,AQP-3 ELISA Kit

MouseEstradiolreceptor,ERELISAKit小鼠雌二醇受體(ER)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

RatVitaminC,VCELISA試劑盒大鼠維生素C(VC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Humanmacrophageinflammatoryprotein2,MIP-2ELISA試劑盒人巨噬細(xì)胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanPentosidineELISAKit人戊糖素(Pentosidine)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人組織蛋白酶S(cath-S)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat lipoprotein alpha (Lp- alpha) ELISA Kit 大鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒

Humananti-hepatitisBviruscoreIgM,HBc-IgMantibodyELISAKit 人抗乙型肝炎病毒核心IgM抗體(HBcAb-IgM)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanhemeoxygenase1,HO-1ELISA試劑盒人血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織鈣離子濃度比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

Humanmastcelltryptase,MCISAKit人肥大細(xì)胞類(lèi)*(MCT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
his標(biāo)簽蛋白純化試劑盒5ml實(shí)驗(yàn)方法大鼠信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子(Smad1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠心型脂肪酸結(jié)合蛋白（h-FABP）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠心磷脂抗體IgA（ACAIgA）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝