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更新時(shí)間:2017-07-10 10:08:59瀏覽次數(shù):95次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
我司透析袋27mm,截留分子量3.5kd 1卷,5M 售后服務(wù)本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購(gòu)模式!我們將竭誠(chéng)為您服務(wù),咨詢!
透析袋27mm,截留分子量3.5kd 1卷,5M 售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對(duì)照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
透析袋27mm,截留分子量3.5kd 1卷,5M 售后服務(wù)注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
(7)PI染色時(shí)間過長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
CSF1 Protein Mouse 重組小鼠 M-CSF / CSF-1 蛋白
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
FCER1A Others Mouse 小鼠 FcERI / FCER1A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
HSC-T6細(xì)胞,鼠肝星形細(xì)胞 SW620(結(jié)腸癌細(xì)胞) 人前列腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PC-3M-2B4
人肺泡上皮細(xì)胞RNAHPAEpiC miRNA5 μg
SW620(人結(jié)腸癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/4664T/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
CM-H053人子宮平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
DIRAS3 Others Human 人 ARHI / DIRAS3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞HA-h
Hs 181.Tes細(xì)胞,正常人細(xì)胞 人癌細(xì)胞,HCC1937細(xì)胞 平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基SMCM-sf
黃牛皮膚細(xì)胞;BTA-S2
KLK13 Others Human 人 KLK13 / Kallikrein-13 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
HEXA Others Human 人 Hexosaminidase A / HEXA Subunit A 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人食道上皮細(xì)胞裂解物HEEpiCL
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT-15 [HCT15]
Acc-2細(xì)胞,涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞 人胃腺癌細(xì)胞,MGC-803細(xì)胞 兔晶體上皮細(xì)胞永生系;N/N1003A(RLE)
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);P19-CAG-tTA-3C3
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Indonesia/5/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
小鼠*S轉(zhuǎn)移酶θ2(GSTθ2)ELISA試劑盒 ,英文名: GSTθ2 ELISA Kit
人水通道蛋白5(AQP-5)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanAquaporin5,AQP-5ELISAKit 96T/48T
大鼠水通道蛋白2(AQP-2)免疫試劑盒 Rat Aquaporin 2,AQP-2 ELISA Kit
英文名稱RatHCGELISAKit大鼠絨毛*(HCG)規(guī)格:96T/48T
活化*12(FACTORXIIa)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKith-FABP人心型脂肪酸結(jié)合蛋白規(guī)格:48T/96T
人組織多肽抗原(TPA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human hepatitis B virus surface antigen (HBsAg) ELISA Kit 人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA試劑盒
Humananti-hepatitisBviruseantibody,HBeAbELISAKit 人抗乙型肝炎病毒e抗體(HBeAb)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanHelicobacterpyloriIgG,Hp-IgGELISA試劑盒人幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶(CALCINEURIN;PP2B)活性定磷比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
HumanMatrixGlaProtein,MGPELISAKit人基質(zhì)γ羧基*蛋白(MGP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
透析袋27mm,截留分子量3.5kd 1卷,5M 售后服務(wù)大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠血管緊張素原(aGT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠血管緊張素Ⅱ轉(zhuǎn)化酶(ACEⅡ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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