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更新時間:2017-07-10 10:07:29瀏覽次數(shù):143次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)透析袋27mm,截留分子量14kd 1卷,5M使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
透析袋27mm,截留分子量14kd 1卷,5M使用說明書操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
透析袋27mm,截留分子量14kd 1卷,5M使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
CX3CL1 Protein Human 重組人 Fractalkine / CX3CL1 蛋白 (His 標簽)
人心臟微血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
TNFSF15 Others Rat 大鼠 TNFSF15 / TL1A 人細胞裂解液 (陽性對照)
MLTC-1細胞,小鼠間質(zhì)細胞瘤細胞 KG-1(白血病細胞) 人惡性黑色素瘤細胞;A-375 [A375]
人肝竇內(nèi)皮細胞RNAHHSEC miRNA5 μg
SV-HUC-1(人膀胱上皮永生化細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人小腦星形膠質(zhì)細胞cDNAHA-c cDNA
DLL1 Others Rat 大鼠 DLL1 / Delta-like 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠Lewis肺癌瘤株;LLT
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B6 II型膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL
Caco-2,人結(jié)直腸腺癌細胞 Human
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Hong kong/213/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)
COLEC10 Others Cynomolgus 食蟹猴 COLEC10 人細胞裂解液 (陽性對照)
人食道平滑肌細胞cDNAHESMC cDNA
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B1
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B2 *-EDTA(含100mL酶解緩沖液) 10mL
MDA-MB-231(ATCC來源), 人癌細胞 Human
PLA2G2A Others Human 人 PLA2G2A / PLA2B 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠鱗狀細胞癌抗原2(SCCA2)ELISA試劑盒 ,英文名: SCCA2 ELISA Kit
人水蛭素(Hirudin)ELISA檢測試劑盒HumanHirudinELISAKit 96T/48T
大鼠一氧化氮(NO)免疫試劑盒 Rat nitric oxide,NO ELISA Kit
英文名稱核糖體、P抗體、IgG/M/A規(guī)格:96T/48T
副傷*B(SalmonellaParatyphiB)標準曲線定量PCR擴增檢測試劑盒2次
ELISAKitLXA4人脂氧素A4規(guī)格:48T/96T
人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human acetylcholinesterase (AChE) ELISA Kit 人乙酰*酯酶(AChE)ELISA試劑盒
Humananti-hepatitisAvirusIgGantibody,anti-HAVELISAKit 人抗甲型肝炎病毒IgG抗體(anti-HAV)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanHeatShockProteinglycoprotein96,HSPgp96ELISA試劑盒人熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織副傷*B(SalmonellaParatyphiB)定性基因檢測試劑盒20次
Humanmatrixmetalloproteinase11,MMP11ELISAKit人基質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP11)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
透析袋27mm,截留分子量14kd 1卷,5M使用說明書大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠血管舒緩激肽(BK)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠血管生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠血管生成素受體Tie1(ANG-R-Tie1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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