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透析袋27mm,截留分子量7kd 1卷,5M實驗方法

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更新時間:2017-07-10 10:06:37瀏覽次數(shù):173次

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透析袋27mm,截留分子量7kd 1卷,5M實驗方法注意事項
1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
7PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
透析袋27mm,截留分子量7kd 1卷,5M實驗方法實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
1)取 1060 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
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CXCL12 Protein Human 重組人 CXCL12 / SDF1b 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

人心肌成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL

HEPACAM2 Others Rat 大鼠 HepaCAM2 人細胞裂解液 (陽性對照)

PC-12細胞,大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化) HT-29(結(jié)腸癌細胞) 人子宮內(nèi)膜腺癌細胞;HEC-1-B

人心肌細胞-RNAHCM-a miRNA5 μg

SVEC4-10(小鼠淋巴結(jié)內(nèi)皮細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CCL2 / MCP-1 / MCP1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
食管平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

DMP1 Others Human DMP1 人細胞裂解液 (陽性對照)

NRK-52E 大鼠腎細胞

大額牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-2

Caki-1, 人腎透明細胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細胞

人腦瘤細胞;SF763 大鼠頜下腺上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
人骨髓間充質(zhì)干細胞(骨髓)(HMSC-bm)(5×105)

人十二脂腸腺癌;HuTu-80

CM-R032大鼠腸靜脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL

小鼠單核巨噬細胞;J774A.1 小鼠肝動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL

mRTEC, 小鼠腎小管上皮細胞 Mouse

FZD10 Others Mouse 小鼠 FZD10 / Frizzled-10 / CD350 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人瞬時受體電位陽離子通道,亞科C,成員6(TRPC6)免疫試劑盒 Human Short transient receptor potential channel 6,TRPC6 ELISA kit

MouseEpinephrine/Adrenaline,EPIELISAKit小鼠腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

RatvisfatinELISA試劑盒大鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

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Humanparathyroidhormone-likeprotein,PLPELISAKit人甲狀旁腺激素樣蛋白(PLP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人組織型纖維溶酶激活物(t-PA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

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