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更新時間:2017-07-10 10:05:10瀏覽次數(shù):119次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)SDS-PAGE濃縮膠緩沖液(4×)500ml免費代測注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
SDS-PAGE濃縮膠緩沖液(4×)500ml免費代測實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
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IL8 Protein Human 重組人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 6-77)
人膀胱成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL
NCSTN Others Mouse 小鼠 Nicastrin / NCSTN 人細胞裂解液 (陽性對照)
C6細胞,大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞 cv-1(非洲綠猴腎細胞) 人癌細胞;MCF 7B
人胚胎氣管組織來源細胞;CCC-HBE-2
SMMC-7721(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CD320 / 8D6A 人細胞裂解液 (陽性對照)
婆羅門牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-4
DPP4 Others Cynomolgus 食蟹猴 DPP4 / DPPIV / CD26 人細胞裂解液 (陽性對照)
食管上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
3T3 swiss細胞,swiss鼠胚胎成纖維細胞 人癌細胞,MB-271細胞 LDH細胞毒性檢測試劑盒LDH
非洲綠猴腎細胞;CV-1
IL17RD Others Human 人 IL17RD 人細胞裂解液 (陽性對照)
馬間葉干細胞(脂肪)(5×105)
人腎小球內(nèi)皮細胞RNAHRGEC miRNA5 μg
牛源細胞
C57小鼠黑色素瘤瘤株;ME (Me) 小鼠真皮成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL
人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細胞 Human
TNFRSF14 Others Human 人 TNFRSF14 / HVEA / HVEM 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠核因子κB2(NFκB2)ELISA試劑盒 ,英文名: NFκB2 ELISA Kit
人*/*蛋白磷酸酶(STK)ELISA檢測試劑盒Humanserine/threonineproteinkinase,STKELISAKit 96T/48T
大鼠網(wǎng)膜素(omentin)免疫試劑盒 Rat omentin ELISA Kit
英文名稱RatDHEA-S-7ELISAKit大鼠脫氫表雄同-S-7(DHEA-S-7)規(guī)格:96T/48T
紅外光譜(ESR)分析20樣本
ELISAKitangiostatin人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白規(guī)格:48T/96T
山羊白介素2(IL-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human amiodarone (AD) ELISA Kit 人乙胺碘呋酮(AD)ELISA試劑盒
Humanglutathione,GSHELISAKit 人*(GSH)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanHeatShockProtein20,HSP-20ELISA試劑盒人熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織輔酶A含量比色法定量檢測試劑盒20次
HumanMatrixmetalloproteinase7,MMP-7ELISAKit人基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
SDS-PAGE濃縮膠緩沖液(4×)500ml免費代測大鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠一氧化氮(NO)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠*(FA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠氧還原蛋白過氧化物酶2(P2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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