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5×非變性蛋白上樣緩沖液5ml使用說明書

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更新時間:2017-07-10 10:01:17瀏覽次數(shù):199次

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5×非變性蛋白上樣緩沖液5ml使用說明書CCL8 Protein Mouse 重組小鼠 CCL8 / MCP-2 蛋白 (His & NusA 標簽)

人腎皮層上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL

IL20RB Others Rat 大鼠 IL20RB 人細胞裂解液 (陽性對照)

B16-Fo細胞,鼠黑色素瘤細胞系 WI-38(胚肺細胞) 人晶體上皮細胞永生系;SRA01/04(HLE)

人胚胎心臟成纖維樣細胞;HEH2

SGC7901(人胃癌細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 HER2 / ErbB2 人細胞裂解液 (陽性對照)

5×非變性蛋白上樣緩沖液5ml使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請 離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
5×非變性蛋白上樣緩沖液5ml使用說明書操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)515min
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡;
1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應(yīng)5 min
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
5×非變性蛋白上樣緩沖液5ml使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細胞;
3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS4)重懸細胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細胞;
5Annexin V-FITC標記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標記:上機前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機前,補加200μL1×Binding Buffer。
腦膜細胞培養(yǎng)基MenCM

EDA2R Others Cynomolgus 食蟹猴 XEDAR / EDA2R 人細胞裂解液 (陽性對照)

人張氏肝細胞;Chang liver

SUME-a細胞,人鼻咽癌細胞系 大鼠肝癌細胞,RH-35細胞 CM-H087人冠狀動脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL

P19(小鼠畸胎瘤細胞) 5×106cells/瓶×2

Promocell C-27417 Preadipocyte Growth Medium KIT, 前脂肪細胞生長培養(yǎng)基套裝 500ml
EFNB3 Others Rat 大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 人細胞裂解液 (陽性對照)

人腎上腺皮質(zhì)腺癌細胞;NCI-H295R

人直結(jié)腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL

L1210細胞,小鼠白血病細胞 多形擬桿菌 大額牛腎細胞;BFR-K1

CCL24 Protein Human 重組人 CCL24 / Eotaxin-2 / MPIF-2 蛋白 (His 標簽)

P3X63Ag8(小鼠骨髓瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 SARS冠狀病毒 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠IL2誘導(dǎo)T細胞激酶(ITK)ELISA試劑盒 ,英文名: ITK ELISA Kit

人原激活的蛋白激酶/MAP激酶(MAPK)ELISA檢測試劑盒Humanmitogenactivitedproteinkinase,MAPKELISAKit 96T/48T

大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)免疫試劑盒 Rat Bone morphogenetic protein 2,BMP-2 ELISA Kit

CLIAKitforVS(Humanversican/PG-M/PG-350)ELISAkit人多功能蛋白聚糖規(guī)格:48T/96T

麥類植物植酸比色法定量檢測試劑盒20

ELISAKitCED-3人美麗線蟲凋亡基因規(guī)格:48T/96T
山羊內(nèi)啡肽(EP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat free prostate specific antigen (fPSA) ELISA Kit 大鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒

Humanlipoproteinlipase,LPLELISAKit 人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humangrowth-regulatedoncogeneα/melanomagrowthstimulatingactivity,GROα/MGSAELISA試劑盒人生長調(diào)節(jié)致癌基因α/黑素瘤生激因子(GROα/CXCL1/MGSA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織二胺氧化酶(DAO)活性比色法定量檢測試劑盒20

Humanmelanomametastasissurfaceadhesionmolecule,MMSAMELISAKit人黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
5×非變性蛋白上樣緩沖液5ml使用說明書大鼠脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠正常T細胞表達和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠粘蛋白3(MUC3)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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