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更新時(shí)間:2017-07-10 10:01:17瀏覽次數(shù):190次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
5×非變性蛋白上樣緩沖液5ml使用說明書CCL8 Protein Mouse 重組小鼠 CCL8 / MCP-2 蛋白 (His & NusA 標(biāo)簽)
人腎皮層上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
IL20RB Others Rat 大鼠 IL20RB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
B16-Fo細(xì)胞,鼠黑色素瘤細(xì)胞系 WI-38(胚肺細(xì)胞) 人晶體上皮細(xì)胞永生系;SRA01/04(HLE)
人胚胎心臟成纖維樣細(xì)胞;HEH2
SGC7901(人胃癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 HER2 / ErbB2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
5×非變性蛋白上樣緩沖液5ml使用說明書使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng) 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
5×非變性蛋白上樣緩沖液5ml使用說明書操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
5×非變性蛋白上樣緩沖液5ml使用說明書實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
腦膜細(xì)胞培養(yǎng)基MenCM
EDA2R Others Cynomolgus 食蟹猴 XEDAR / EDA2R 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人張氏肝細(xì)胞;Chang liver
SUME-a細(xì)胞,人鼻咽癌細(xì)胞系 大鼠肝癌細(xì)胞,RH-35細(xì)胞 CM-H087人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
P19(小鼠畸胎瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-27417 Preadipocyte Growth Medium KIT, 前脂肪細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基套裝 500ml
EFNB3 Others Rat 大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞;NCI-H295R
人直結(jié)腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
L1210細(xì)胞,小鼠白血病細(xì)胞 多形擬桿菌 大額牛腎細(xì)胞;BFR-K1
CCL24 Protein Human 重組人 CCL24 / Eotaxin-2 / MPIF-2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
P3X63Ag8(小鼠骨髓瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 SARS冠狀病毒 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
小鼠IL2誘導(dǎo)T細(xì)胞激酶(ITK)ELISA試劑盒 ,英文名: ITK ELISA Kit
人原激活的蛋白激酶/MAP激酶(MAPK)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanmitogenactivitedproteinkinase,MAPKELISAKit 96T/48T
大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)免疫試劑盒 Rat Bone morphogenetic protein 2,BMP-2 ELISA Kit
CLIAKitforVS(Humanversican/PG-M/PG-350)ELISAkit人多功能蛋白聚糖規(guī)格:48T/96T
麥類植物植酸比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitCED-3人美麗線蟲凋亡基因規(guī)格:48T/96T
山羊內(nèi)啡肽(EP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat free prostate specific antigen (fPSA) ELISA Kit 大鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒
Humanlipoproteinlipase,LPLELISAKit 人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humangrowth-regulatedoncogeneα/melanomagrowthstimulatingactivity,GROα/MGSAELISA試劑盒人生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因α/黑素瘤生激因子(GROα/CXCL1/MGSA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織二胺氧化酶(DAO)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
Humanmelanomametastasissurfaceadhesionmolecule,MMSAMELISAKit人黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
5×非變性蛋白上樣緩沖液5ml使用說明書大鼠脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠粘蛋白3(MUC3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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