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更新時(shí)間:2017-07-10 10:00:26瀏覽次數(shù):173次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
Tris-*電泳緩沖液(5×SDS-PAGE)500ml免費(fèi)代測(cè)注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
(7)PI染色時(shí)間過長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
Tris-*電泳緩沖液(5×SDS-PAGE)500ml免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
我司Tris-*電泳緩沖液(5×SDS-PAGE)500ml免費(fèi)代測(cè)本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購(gòu)模式!我們將竭誠(chéng)為您服務(wù),咨詢!
CXCL1 Protein Human 重組人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & NusA 標(biāo)簽)
人支持細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CD48 Others Rat 大鼠 CD48 / SLAMF2 / BCM1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
EL4細(xì)胞,小鼠淋巴瘤細(xì)胞 3T3-Swiss albino(胚胎成纖維細(xì)胞) 人肺轉(zhuǎn)化細(xì)胞;AE1201
人胚腎細(xì)胞;293 Cells, low passage
SCaBER(人膀胱鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人虹膜色素上皮細(xì)胞HIPEpiC
EDA2R Others Rat 大鼠 XEDAR / EDA2R 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
大鼠腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CCRF-CEM [CCRF CEM]人急性淋巴細(xì)胞白血病T淋巴細(xì)胞 The CCRF-CEM [CCRF CEM] human acute lymphoblastic leukemia T lymphocytes 1640+10%Hyclone 滅活血清
EGF Protein Human 重組人 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
293ET(人胚腎細(xì)胞(SV40T和EBNA1基因修飾細(xì)胞)) 5×106cells/瓶×2 原代心肌細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/250/100ml
LAMP3 Others Cynomolgus 食蟹猴 LAMP3 / DC-LAMP 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人腎上皮細(xì)胞裂解物HREpiCL
小鼠原B細(xì)胞株;BaF3
HIBEpiC細(xì)胞,人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞 人胚胎眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞,HFTF細(xì)胞 猞猁皮膚成纖維樣細(xì)胞;ELS1
LS-174T(人結(jié)腸腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-21170 Small Airway Epithelial CellGrowth Medium KIT, 小呼吸道上皮細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基套裝 500ml
大鼠葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人四連接素(CLEC3B)免疫試劑盒 Human Tetranectin,CLEC3B ELISA kit
線粒體檸檬酸(MCA)含量測(cè)試盒 紫外分光光度法 25管/24樣
RatUltrasensitivityThyroxine,u-T4ELISA試劑盒大鼠高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanL-SelectinELISA試劑盒人L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanPancreaticAmylase,PAMYELISAKit人胰*(PAMY)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
山羊生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human pancreatic amylase (PAMY) ELISA Kit 人胰*(PAMY)ELISA試劑盒
humanhepatitisBvirus,HBVpreS2AgELISAKit 人乙型肝炎病毒前S2抗原(HBVpreS2Ag)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humangrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin,GHRP-GhrelinELISA試劑盒人生長(zhǎng)激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織多巴胺(dopamine)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
Humanmembraneattackcomplex,MACELISAKit人膜攻擊復(fù)合物(MAC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Tris-*電泳緩沖液(5×SDS-PAGE)500ml免費(fèi)代測(cè)大鼠壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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