當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>蛋白提取/檢測>> 丙烯酰胺溶液(30%, 29:1) 100ml免費代測
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更新時間:2017-07-10 09:58:54瀏覽次數(shù):114次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)丙烯酰胺溶液(30%, 29:1) 100ml免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
丙烯酰胺溶液(30%, 29:1) 100ml免費代測操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
丙烯酰胺溶液(30%, 29:1) 100ml免費代測實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
CCL21 Protein Human 重組人 CCL21 / 6Ckine 蛋白
人卵巢成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CD47 Others Rat 大鼠 CD47 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
P3-X63-Ag8.653細(xì)胞,小鼠骨髓瘤細(xì)胞 Ana-1(巨噬細(xì)胞) 人正常上皮細(xì)胞;MCF 10A
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0908
RSC96(大鼠雪旺細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人 SLC27A4 / FATP4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
原代心肌細(xì)胞特制基礎(chǔ)無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/100ml
EDAR Others Rat 大鼠 EDAR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
HaCaT人永生化表皮細(xì)胞 HaCaT immortalized human epidermal cells DMEM+10% FBS
IFNA4 Protein Rat 重組大鼠 IFNA4 / IFNα4 / Interferon alpha-4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
LA795(小鼠肺腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 V79-4(中國倉鼠肺細(xì)胞)
PLK1 Others Mouse 小鼠 PLK1 / PLK-1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞cDNAHRCEpiC cDNA
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);P19-CAG-tTA-1F3
SGC-7901細(xì)胞,胃腺癌細(xì)胞 人食管癌細(xì)胞,Eca-109細(xì)胞 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞;PC-12 [PC12]
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A5
VCAM1 Others Mouse 小鼠 VCAM1 / CD106 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒 ,英文名: MIP-2 ELISA Kit
人酸性成纖維細(xì)胞生長因子1(aFGF-1)ELISA檢測試劑盒Humanacidicfibroblastgrowthfactor1,aFGF-1ELISAKit 96T/48T
豬瘟病毒(CSFV)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法) 48T
CLIAKitforNHE3(HumanNa+/H+exchanger3)ELISAKit人Na+/H+交換體3規(guī)格:48T/96T
體液CMV(CYTOMEGALOVIRUS)病毒定性檢測試劑盒20次
ELISAKitLAT人T細(xì)胞活化連接蛋白規(guī)格:48T/96T
山羊主要組織相容性復(fù)合體(MHC/OLA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat free testosterone (F-TESTO) ELISA Kit 大鼠游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒
humanhepatitisEvirusIgM,HEV-IgMELISAKit 人戊型肝炎病毒IgM(HEV-IgM)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humangrowthhormonerelasingfactor,GH-RFELISA試劑盒人生長激素釋放因子(GH-RF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織對氧磷酶2(PON2)活性比色法定量檢測試劑盒
HumanmembraneIgM,mIgMELISAKit人表面膜免疫球蛋白M(mIgM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
丙烯酰胺溶液(30%, 29:1) 100ml免費代測大鼠組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠組胺(HIS)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠總抗氧化能力(T-AOC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠總*(TC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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