當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>蛋白提取/檢測>> 1.5M Tris (pH8.8) 100ml使用說明書
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更新時間:2017-07-10 09:58:33瀏覽次數(shù):407次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)1.5M Tris (pH8.8) 100ml使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
1.5M Tris (pH8.8) 100ml使用說明書操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
1.5M Tris (pH8.8) 100ml使用說明書實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
CCL14 Protein Human 重組人 CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (His 標(biāo)簽)
人卵巢上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CD68 Others Rat 大鼠 CD68 / Macrosialin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
SP2/0-Ag14細(xì)胞,鼠骨髓瘤細(xì)胞 BALB/3T3(BALB/C小鼠胚成纖維細(xì)胞) 人羊膜細(xì)胞;WISH
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;HH-01
RM-1(小鼠前列腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人 VIPR2 / VPAC2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0903
EDEM2 Others Human 人 EDEM2 / C20orf31 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CL-0401NCI-H446(人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
MDBK細(xì)胞,牛腎細(xì)胞 人慢性髓原白血病細(xì)胞,K562細(xì)胞 人胚胎,皮膚,肌肉;M-22
草魚腎細(xì)胞;GIK
DKK1 Others Human 人 DKK1 / Dkk-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
STK24 Others Human 人 STK24 / MST3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞;HK-2
CM-H013人小氣道平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
MOLT-4細(xì)胞,急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞 髓性甲狀腺癌細(xì)胞,TT細(xì)胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞(傣族);KM9403
615小鼠T細(xì)胞性白血病瘤株;L7712
CD3E Others Human 人 CD3E 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠前列腺素E2(PGE2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人酸性富*核磷蛋白32家族成員E(ANP32E)免疫試劑盒 Human Acidic leucine-rich nuclear phosphoprotein 32 family member E(ANP32E)ELISA kit
動植物組織葡萄糖含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
RatTumorSpecificGrowthFacter/tumorsuppliedgroupoffactor,TGSFELISA試劑盒大鼠腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子(TGSF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanlow-densitylipoprotein-receptor-relatedprotein,LRP-6ELISA試劑盒人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6(LRP-6)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanP27proteinELISAKit人P27蛋白(P27)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
蛇毒因子(CVF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human insulin autoantibodies (IAA) ELISA Kit 人胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒
humanhepatitisEvirusIgG,HEV-IgGELISAKit 人戊型肝炎病毒IgG(HEV-IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanGrowthHormoneBindingProtein,PELISA試劑盒人生長激素結(jié)合蛋白(P)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織對氧磷酶1(PON1)內(nèi)酯酶活性比色法定量檢測試劑盒
HumanMetallothionein2,MT2ELISAKit人金屬硫蛋白2(MT2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
1.5M Tris (pH8.8) 100ml使用說明書大鼠組織因子(TF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠組織蛋白去乙?;?/span>(HD)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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