當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>蛋白提取/檢測>> 1M Tris (pH6.8) 100ml售后服務(wù)
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更新時間:2017-07-10 09:57:46瀏覽次數(shù):107次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
1M Tris (pH6.8) 100ml售后服務(wù)注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時,盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
1M Tris (pH6.8) 100ml售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測或流式細(xì)胞儀分析。
我司1M Tris (pH6.8) 100ml售后服務(wù)本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務(wù),咨詢!
CCL17 Protein Mouse 重組小鼠 CCL17 / TARC 蛋白
人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
SEMA4D Others Rat 大鼠 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
SP2/0細(xì)胞,小鼠骨髓瘤細(xì)胞 CTLL-2(T細(xì)胞) 人胚肺成纖維細(xì)胞;HFL1
人前列腺癌細(xì)胞;DU 145 [DU145;DU-145]
RL95-2(人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人 CGB5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人淋巴成纖維細(xì)胞裂解物HLFL
EDNRB Others Human 人 EDNRB / Endothelin B Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人癌細(xì)胞;MDA-MB-468
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);P19-CAG-tTA-3C3 彈性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL
SKOV3/Taxol-25, 人卵巢癌*耐藥細(xì)胞株 Human
CLU Others Human 人 CLU / Clusterin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CLEC6A Others Human 人 CLEC4N / CLEC6A / Dectin-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞;HK-2
C57BL/6小鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 C57BL/6 mouse bone marrow mesenchymal stem cells
HSC1細(xì)胞,人黑色素瘤細(xì)胞 羅伊氏乳桿菌 人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞;RAMOS(RA.1)
WPMY-1(人正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
JAR(人胎盤絨毛膜癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 MG-63, 人骨肉瘤細(xì)胞 人胃腺癌細(xì)胞;BGC-823
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP7)ELISA試劑盒 ,英文名: MMP7 ELISA Kit
人酸性磷酸酶(ACP)ELISA檢測試劑盒HumanAcidPhosphatase,ACPELISAKit 96T/48T
大鼠纖溶抑制因子/*激活的纖溶抑制物(TAFI)免疫試劑盒 Rat Thrombin activatable fibrinolysis inhibitor,TAFI ELISA Kit
英文名稱RatAngiogeninELISAKit大鼠血管生長素(Angiogenin)規(guī)格:96T/48T
果菜甲酸比色法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitNOS人一氧化氮合成酶規(guī)格:48T/96T
雙花扁豆凝集素(DBA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human proinsulin (PI) ELISA Kit 人胰島素原(PI)ELISA試劑盒
HumanHepatitisDvirusIgM,HDVIgMELISAKit 人丁型肝炎IgM(HDVIgM)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumangranzymesB,Gzms-BELISA試劑盒人顆粒酶B(Gzms-B)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織對氧磷酶1(PON1)芳香酯酶活性比色法定量檢測試劑盒
HumanMetallothionein,MISAKit人金屬硫蛋白(MT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
1M Tris (pH6.8) 100ml售后服務(wù)鵝超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
鵝白介素4(IL-4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
鵝P450*側(cè)鏈裂解酶(P450scc)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
鵝3β羥基類固醇脫氫酶(3β-HSD)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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