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更新時間:2017-07-10 09:55:42瀏覽次數:118次
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SDS-PAGE 電泳液(5X)100ml售后服務實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
SDS-PAGE 電泳液(5X)100ml售后服務注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
XCL1 Protein Human 重組人 XCL1 蛋白 (His 標簽)
人肝星形細胞*培養(yǎng)基 100mL
IL18RAP Others Cynomolgus 食蟹猴 IL18RAP 人細胞裂解液 (陽性對照)
Lewis細胞,小鼠肺癌細胞 CHL/IU [ CHL-11 ](中國倉鼠肺細胞) 非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A
人非小細胞肺腺癌細胞;NCI-H157
Raji(人Burkitt's淋巴瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 SerpinE1 / PAI-1 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0378MC3T3-E1 Subclone 14(小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14)5×106cells/瓶×2
EFNA5 Others Rat 大鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠肺成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL
3T6-Swiss albino小鼠胚胎成纖維細胞 3T6-Swiss albino mouse embryo fibroblasts DMEM培養(yǎng)基+10%FBS
IL36G Protein Human 重組人 IL36G / IL1F9 蛋白
NCI-H2452(人間皮瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 SW620(結腸癌細胞)
NPC2 Others Human 人 Niemann-Pick disease type C2 / NPC2 人細胞裂解液 (陽性對照)
人神經細胞HN
豹貓肺成纖維樣細胞;LCL1
人APP-PS1(C410Y)雙基因轉染細胞株;7WCY1.0 食管癌細胞,TE-1細胞 PK-15細胞,豬腎細胞系
人成纖維細胞;HFF
HA Others H8N4 甲型流感 H8N4 (A/pintail duck/Alberta/114/1979) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒 ,英文名: NGAL ELISA Kit
人髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質抗體IgG(MPO-ANCAIgG)ELISA檢測試劑盒HumanMousemyeloperoxidase-antineutrophilcytoplasmicantibodyIgG,MPO-ANCAIgGELISAkit 96T/48T
大鼠波形蛋白(VIM)免疫試劑盒 Rat vimentin,VIM ELISA Kit
CLIAKitforTLR-9/CD289ELISAkit大鼠Toll樣受體9規(guī)格:48T/96T
全組織免疫組織化學AP酶聯(lián)NBT/BCIP間接檢測試劑盒(含AP二抗)20次
ELISAKitASA人抗皮膚抗體規(guī)格:48T/96T
兔β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat inhibin B (INH-B) ELISA Kit 大鼠抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒
Humananti-rubellavirusIgGantibody,anti-RVIgGELISAKit 人抗風疹病毒IgG抗體(anti-RVIgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanGlypican-3,GPC-3ELISA試劑盒人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織丁酰*酯酶活性熒光定量檢測試劑盒20次
HumanMidkine,MKELISAKit人中期因子(MK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
SDS-PAGE 電泳液(5X)100ml售后服務猴超敏C反應蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
猴白介素6(IL-6)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
猴γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
猴α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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