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更新時間:2017-07-10 09:52:21瀏覽次數:128次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網Western轉移緩沖液(5X),NC 500ml實驗方法CCL15 Protein Human 重組人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 46-113, His 標簽)
人肝動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
CCDC47 Others Human 人 CCDC47 人細胞裂解液 (陽性對照)
P815細胞,小鼠肥大細胞癌細胞 V79-4(中國倉鼠肺細胞) 非洲綠猴腎細胞系/HCV-C;Vero-HCV-C
人結直腸腺癌細胞;COLO 320DM [COLO320DM]
QGY-7701(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 EphA3 人細胞裂解液 (陽性對照)
Western轉移緩沖液(5X),NC 500ml實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
Western轉移緩沖液(5X),NC 500ml實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Western轉移緩沖液(5X),NC 500ml實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
CL-00074T1(小鼠癌細胞)5×106cells/瓶×2
EFNA5 Others Rat 大鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠子宮平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
TM3小鼠間質細胞 TM3 mouse Leydig cells D-MEM/F-12培養(yǎng)基(GIBCO)+5%馬血清+2.5%FBS
IL20 Protein Human 重組人 IL20 / Interleukin-20 蛋白
SNU-5(人胃癌細胞) 5×106cells/瓶×2 293(轉染腺病毒E1A基因的人腎上皮細胞)
IL4R Others Rat 大鼠 IL4R / Il4ra 人細胞裂解液 (陽性對照)
人神經細胞HM
大鼠小腸粘膜上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
K-562人慢性髓原白血病細胞 K-562 chronic myelogenous leukemia cells 1640+10% FBS
FGF21 Protein Human 重組人 FGF21 蛋白 (His 標簽)
Caki-2(人腎透明細胞癌細胞) 5×106cells/瓶×2 人腎小管上皮細胞HRPTEpiC
大鼠前心鈉肽(Pro-ANP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人髓磷脂P2蛋白(PMP2)免疫試劑盒 Human Myelin P2 protein,PMP2 ELISA kit
Na+k+ ——ATP酶測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
RatTumornecrosisfactorsolublereceptorⅡ,TNFsR-ⅡELISA試劑盒大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanliverspecificlipoprotein,LSPELISA試劑盒人抗肝特異性脂蛋白抗體(LSP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanovalbuminspecificIgE,OVAsIgEELISAKit人卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔*(ADR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human insulin-like growth factor 2 (IGF-2) ELISA Kit 人胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA試劑盒
Humananti-typhusantibodyELISAKit 人抗斑疹傷寒抗體(anti-typhus-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanglycosylation-dependentcelladhesionmolecule-1,GlyCAM-1ELISA試劑盒人糖基化依賴的細胞黏附分子(GlyCAM-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織丁酰*酯酶活性化學發(fā)光法定量檢測試劑盒20次
humanmitogenactivatedproteinkinasekinase6,MKK6ELISAKit人原活化蛋白激酶激酶6(MKK6)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Western轉移緩沖液(5X),NC 500ml實驗方法猴載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
猴胰島素(INS)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
猴可溶性血管細胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
猴可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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