當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>蛋白提取/檢測>> Tween20/TBS溶液(10×TBST,pH7.5)500ml售后服務(wù)
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更新時間:2017-07-10 09:45:49瀏覽次數(shù):172次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)Tween20/TBS溶液(10×TBST,pH7.5)500ml售后服務(wù)使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
Tween20/TBS溶液(10×TBST,pH7.5)500ml售后服務(wù)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Tween20/TBS溶液(10×TBST,pH7.5)500ml售后服務(wù)實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
CCL24 Protein Human 重組人 CCL24 / Eotaxin-2 / MPIF-2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
人直結(jié)腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
EFNB3 Others Rat 大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
L1210細(xì)胞,小鼠白血病細(xì)胞 多形擬桿菌 大額牛腎細(xì)胞;BFR-K1
人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞;NCI-H295R
P3X63Ag8(小鼠骨髓瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 SARS冠狀病毒 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CL-0394NCI-H2170(人肺鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
EFNB2 Others Rat 大鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
小鼠氣管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
NIH/3T3小鼠胚胎細(xì)胞 NIH/3T3 mouse embryo cells DMEM+10%NBCS(小牛血清)
IL37 Protein Human 重組人 IL37 / IL1F7 / IL-1H4 蛋白
NCI-H226(人肺鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 LoVo(結(jié)腸癌細(xì)胞)
人毛發(fā)干細(xì)胞(HHDPC)( 5×105 )
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;BE(2)-M17
人臍靜脈平滑肌細(xì)胞
急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞;TALL-104 大鼠心肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
Pcc4 小鼠畸胎瘤細(xì)胞
CDH17 Others Human 人 CDH17 / Cadherin-17 / LI-cadherin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠去甲(NE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAG Ab)免疫試劑盒 Human anti-myelin associated glycoprotein antibody,MAG Ab ELISA Kit
乙酰輔酶A(Acetyl-CoA)試劑盒 紫外分光 10管/9樣
RatTroponinⅠ,Tn-ⅠELISA試劑盒大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanlipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISA試劑盒人脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanosteoclastdifferentiationfactor,ODFELISAKit人破骨細(xì)胞分化因子(ODF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔半胱酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat aldehyde dehydrogenase (ALDH) ELISA Kit 大鼠乙醛脫氫酶(ALDH)ELISA試劑盒
Humanskinreactivefactor/inflammatoryfactor,SRF/IFELISAKit 人皮膚反應(yīng)因子/炎性因子(SRF/IF)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanGlycogenphosphorylaseII,GP-IIELISA試劑盒人糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織蛋白酶(PROTEASE)活性比色法定量檢測試劑盒20次
Humanmonocytechemotacticprotein2,MCP-2ELISAKit人單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Tween20/TBS溶液(10×TBST,pH7.5)500ml售后服務(wù)雞B因子(BF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雞5核苷酸酶(5-NT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雞17-類固醇(17-KS)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雞17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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