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更新時間:2017-07-10 09:45:49瀏覽次數(shù):185次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網Tween20/TBS溶液(10×TBST,pH7.5)500ml售后服務使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
Tween20/TBS溶液(10×TBST,pH7.5)500ml售后服務操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Tween20/TBS溶液(10×TBST,pH7.5)500ml售后服務實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
CCL24 Protein Human 重組人 CCL24 / Eotaxin-2 / MPIF-2 蛋白 (His 標簽)
人直結腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
EFNB3 Others Rat 大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 人細胞裂解液 (陽性對照)
L1210細胞,小鼠白血病細胞 多形擬桿菌 大額牛腎細胞;BFR-K1
人腎上腺皮質腺癌細胞;NCI-H295R
P3X63Ag8(小鼠骨髓瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 SARS冠狀病毒 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0394NCI-H2170(人肺鱗癌細胞)5×106cells/瓶×2
EFNB2 Others Rat 大鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠氣管上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
NIH/3T3小鼠胚胎細胞 NIH/3T3 mouse embryo cells DMEM+10%NBCS(小牛血清)
IL37 Protein Human 重組人 IL37 / IL1F7 / IL-1H4 蛋白
NCI-H226(人肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 LoVo(結腸癌細胞)
人毛發(fā)干細胞(HHDPC)( 5×105 )
人神經母細胞瘤細胞;BE(2)-M17
人臍靜脈平滑肌細胞
急性T淋巴細胞白血病細胞;TALL-104 大鼠心肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
Pcc4 小鼠畸胎瘤細胞
CDH17 Others Human 人 CDH17 / Cadherin-17 / LI-cadherin 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠去甲(NE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人髓鞘相關糖蛋白抗體(MAG Ab)免疫試劑盒 Human anti-myelin associated glycoprotein antibody,MAG Ab ELISA Kit
乙酰輔酶A(Acetyl-CoA)試劑盒 紫外分光 10管/9樣
RatTroponinⅠ,Tn-ⅠELISA試劑盒大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanlipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISA試劑盒人脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanosteoclastdifferentiationfactor,ODFELISAKit人破骨細胞分化因子(ODF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔半胱酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat aldehyde dehydrogenase (ALDH) ELISA Kit 大鼠乙醛脫氫酶(ALDH)ELISA試劑盒
Humanskinreactivefactor/inflammatoryfactor,SRF/IFELISAKit 人皮膚反應因子/炎性因子(SRF/IF)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanGlycogenphosphorylaseII,GP-IIELISA試劑盒人糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織蛋白酶(PROTEASE)活性比色法定量檢測試劑盒20次
Humanmonocytechemotacticprotein2,MCP-2ELISAKit人單核細胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Tween20/TBS溶液(10×TBST,pH7.5)500ml售后服務雞B因子(BF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雞5核苷酸酶(5-NT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雞17-類固醇(17-KS)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雞17羥皮質類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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