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更新時間:2017-07-10 09:41:51瀏覽次數(shù):108次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)Tris緩沖鹽溶液(10×TBS,pH7.4)500ml免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
Tris緩沖鹽溶液(10×TBS,pH7.4)500ml免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Tris緩沖鹽溶液(10×TBS,pH7.4)500ml免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
CXCL16 Protein Rat 重組大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (Fc 標簽)
人食管平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
PTGDS Others Human 人 PTGDS / L-PGDS 人細胞裂解液 (陽性對照)
7WPS1細胞,人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株 變異鏈球菌 兔間變表皮鱗癌瘤株;VX2
小鼠漿細胞瘤;MPC-11
OK(負鼠腎小管細胞) 5×106cells/瓶×2 人 AMBP / Alpha 1 microglobulin 人細胞裂解液 (陽性對照)
軟骨細胞生長添加物CGS
EGF Others Mouse 小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 人細胞裂解液 (陽性對照)
人骨肉瘤細胞;U-2 OS [U2OS;U2-OS;U-2OS]
NP69-SV40T細胞,永生化鼻咽上皮細胞系 小鼠細胞,C127細胞 非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS2;Vero-HCV-NS2
MS1(小鼠胰島內(nèi)皮細胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-23160 Skeletal Muscle Cell GrowthMedium KIT, 骨骼肌細胞生長培養(yǎng)基套裝 500ml
CAMKV Others Human 人 CAMKV 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人少突膠質(zhì)前體細胞-懸浮生長HOPC-os
家貓肺細胞;FCA-L2
SRSV/3T3細胞,SRSV轉(zhuǎn)化的3T3細胞 人胰腺癌細胞,SW1990細胞 CM-M032小鼠腸靜脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞;PC-12 [PC12]
BSG Others Human 人 CD147 / EMMPRIN / Basigin 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人羧化基質(zhì)*蛋白(ucMGP)免疫試劑盒 Human undercarboxylated matrix Gla protein,ucMGP ELISA kit
BCA蛋白法含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
Rattransforminggrowthfactor-beta-stimulatedProteinclone-22,TSC22ELISA試劑盒大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β刺激蛋白22(TSC22)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanlipocalin2,LCN2ELISA試劑盒人脂質(zhì)運載蛋白2(LCN2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanOrnithinedecarboxylase,ODCELISAKit人*脫羧酶(ODC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔骨橋素(OPN)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human trypsinogen II (Try- II) ELISA Kit 人*原Ⅱ(Try-Ⅱ)ELISA試劑盒
Humananti-epidemichemorrhagicfevervirusIgGantibody,EHFIgGELISAKit 人抗流行性出血熱病毒抗體IgG(EHF)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanglutathioneS-transferases,GSTpiELISA試劑盒人*硫轉(zhuǎn)移酶pi基因(GSTpi)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織單胺氧化酶B型(MAO-B)活性比色法定量檢測試劑盒20次
HumanMothersagainstdecapentaplegichomolog7,Smad7ELISAKit人Smad7ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Tris緩沖鹽溶液(10×TBS,pH7.4)500ml免費代測雞雌二醇(E2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雞傳染性貧血病毒(CIAV)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雞傳染性鼻炎抗體(IC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雞層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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