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更新時間:2017-07-10 09:35:33瀏覽次數(shù):100次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)Western轉(zhuǎn)移緩沖液(5×),PVDF500ml售后服務使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
Western轉(zhuǎn)移緩沖液(5×),PVDF500ml售后服務操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Western轉(zhuǎn)移緩沖液(5×),PVDF500ml售后服務實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
CCL27 Protein Human 重組人 CCL27 / CTACK 蛋白 (His 標簽)
人前列腺上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
REG3A Others Rat 大鼠 REG3A 人細胞裂解液 (陽性對照)
TSCCA細胞,人舌鱗癌細胞系 * 黑化大家鼠肺成纖維細胞;NRm
大鼠腦膠質(zhì)瘤細胞;C6
MS1(小鼠胰島內(nèi)皮細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H7N2 (A/ruddy turnstone/New Jersey/563/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人導管癌細胞;ZR-75-30
ENPEP Others Rat 大鼠 ENPEP / Aminopeptidase A (aa 41-945) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
C2C12, 小鼠肌原細胞
RSC, 大鼠雪旺細胞 NCYC 234[IPAZSC 148]細胞 COS-7(SV40 轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞)
人鼻咽癌細胞;CNE-2Z
DLL4 Others Mouse 小鼠 DLL4 / Delta4 人細胞裂解液 (陽性對照)
CD84 Others Mouse 小鼠 CD84 人細胞裂解液 (陽性對照)
人導管瘤細胞;BT-474
Dami 人成巨核細胞白血病細胞
MHCC-97L人肝癌細胞(低轉(zhuǎn)移) MHCC-97L human hepatoma cells (low metastasis) DMEM+10%FBS
TNFSF11 Protein Human 重組人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白
人結(jié)膜纖維原細胞(HConF)(5×105 ) HAVSMC, 人主動脈平滑肌細胞 Human
大鼠熱休克因子1(HSF1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胎盤堿性磷酸酶(PLAP)免疫試劑盒 Human Placental alkaline pkosphatase,PLAP ELISA Kit
乙酸激酶(ACK)測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣
RatTissue-typePlasiminogenActilyse,t-PAELISA試劑盒大鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanLeukotrieneC4,LT-C4ELISA試劑盒人白三烯C4(LTC4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
humanoncostatinMreceptor,OSMRELISAKit人制瘤素M受體(OSMR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔抗糖蛋白抗體(GP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat insulin autoantibodies (IAA) ELISA Kit 大鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒
HumanPertussiuToxin,PISAKit 人百日咳毒素(PT)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanglucocorticoidreceptor-β,GR-βELISA試劑盒人糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織超氧化物陰離子化學發(fā)光法定量檢測試劑盒20次
HumanMycoplasmapneumoniaeantibody,MP-AbELISAKit人肺炎支原體抗體(MP-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Western轉(zhuǎn)移緩沖液(5×),PVDF500ml售后服務雞轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雞主要組織相容性復合體(MHC/B)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雞壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體3(TRAIL-R3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雞壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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