TMB底物顯色試劑盒(ELISA,HRP發(fā)光)200ml實(shí)驗(yàn)方法注意事項(xiàng)
（1）本試劑只適用于實(shí)驗(yàn)，不適用于臨床檢測(cè)；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過(guò)皮膚吸收，對(duì)眼睛有刺激作用，使用時(shí)需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí)，盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（4）整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔，勿用力吹打細(xì)胞，盡量在4℃下操作，以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
（5）在細(xì)胞洗滌的后一步，請(qǐng)盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
（7）PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
TMB底物顯色試劑盒(ELISA,HRP發(fā)光)200ml實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對(duì)于細(xì)胞懸液每50～100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中，稀釋至10uM ，處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失，JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光；而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞，CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞：
（1）取 10～60 萬(wàn)細(xì)胞，重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中，細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結(jié)束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細(xì)胞。棄上清，注意盡量不要吸除細(xì)胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
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CXCL14 Protein Human 重組人 CXCL14 / BRAK 蛋白

人成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

CNTN3 Others Rat 大鼠 Contactin 3 / CNTN3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

T6細(xì)胞，人舌癌細(xì)胞 * 大鼠肝細(xì)胞瘤;H-4-II-E

正常大鼠腎細(xì)胞;NRK-52E

MRC-5(人胚肺成纖維細(xì)胞 ) 5×106cells/瓶×2 小鼠 PSGL-1 / CD162 / SELPLG 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
rRTEC, 大鼠腎小管上皮細(xì)胞

ENPP2 Others Human 人 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

大鼠嗅鞘細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

DH82狗腎惡性組織細(xì)胞增生癥細(xì)胞 DH82 dog kidney malignant histiocytosis cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS

IFNA5 Protein Human 重組人 IFNA5 / IFNaG / Interferon alpha-G 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

NCI-H2227(人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 FRhK-4(恒河猴胚腎細(xì)胞)
ENPEP Others Rat 大鼠 ENPEP / Aminopeptidase A (aa 41-945) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人導(dǎo)管癌細(xì)胞;ZR-75-30

C2C12, 小鼠肌原細(xì)胞

RSC, 大鼠雪旺細(xì)胞 NCYC 234[IPAZSC 148]細(xì)胞 COS-7(SV40 轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞)

人鼻咽癌細(xì)胞;CNE-2Z

DLL4 Others Mouse 小鼠 DLL4 / Delta4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
小鼠Ⅴ型膠原α2(COL5α2)ELISA試劑盒 ，英文名： COL5α2 ELISA Kit

人胎盤泌乳素(PL)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanplacetallactogen,PLELISAKit 96T/48T

大鼠肺癌腫瘤抑制因子1(TSLC1)免疫試劑盒 Rat tumor supressor in lung cancer 1,TSLC1 ELISA Kit

CLIAKitforuPA(Rabbiturokinaseplasminogenactivator)ELISAKit兔*型纖溶酶原激活物規(guī)格：48T/96T

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Human plaet derived growth factor soluble receptor alpha (PDGFsR- alpha) ELISA Kit 人血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA試劑盒

HumanCandidaAlbicans,C.albicansELISAKit 人白色念珠菌(C.albicans)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanglucocorticoidreceptor-α,GR-αELISA試劑盒人糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

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