當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>細胞生物學試劑>>蛋白提取/檢測>> 昆蟲核蛋白/胞漿蛋白提取試劑盒50T實驗方法
昆蟲核蛋白/胞漿蛋白提取試劑盒50T實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
昆蟲核蛋白/胞漿蛋白提取試劑盒50T實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
昆蟲核蛋白/胞漿蛋白提取試劑盒50T實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
CX3CL1 Protein Canine 重組狗 Fractalkine / CX3CL1 蛋白 (Fc 標簽)
人臍帶單核細胞*培養(yǎng)基 100mL
SDC1 Others Rat 大鼠 Syndecan-1 / SDC1 / CD138 人細胞裂解液 (陽性對照)
143TK細胞,人胸腺激酶缺陷性細胞系 鼠傷*Ta100 大鼠腎小球系膜細胞;HBZY-1
人APP-PS1(C410Y)雙基因轉染細胞株;7WCY1.0
MG-63(人骨肉瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CD320 / 8D6A 人細胞裂解液 (陽性對照)
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0910
ENPP7 Others Mouse 小鼠 ENPP7 / NPP-7 人細胞裂解液 (陽性對照)
MV3 人黑色素瘤細胞
MG-63人骨肉瘤細胞 Human osteosarcoma cell line MG-63 MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%優(yōu)質熱滅活FBS
DKK1 Protein Rhesus 重組恒河猴 DKK-1 / Dkk1 蛋白 (256 Asn/Gln, Fc 標簽)
人胚肺成纖維細胞;HFL1 人淋巴成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL
LIF Others Mouse 小鼠 LIF 人細胞裂解液 (陽性對照)
人導管癌細胞;HCC38
COLO 205 人結腸癌細胞
U-2 OS-EGFP+puro人骨肉瘤細胞 U-2 human osteosarcoma cell line OS-EGFP+puro McCoy's 5A+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin
CD40LG Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標簽)
人視網膜內皮細胞 (HREC)( 5×105 ) HBE, 正常人支氣管上皮細胞系 Human
小鼠脫氫酶(XDH)ELISA試劑盒 ,英文名: XDH ELISA Kit
人肽基脯氨酰順反異構酶(PPI)ELISA檢測試劑盒HumanPeptidylprolylcis/transisomerase,PPIELISAKit 96T/48T
大鼠*(PG)免疫試劑盒 Rat Pepsin,PG ELISA Kit
英文名稱RatCyclinD2ELISAKit大鼠細胞周期素D2(CyclinD2)規(guī)格:96T/48T
核酸氧化8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)高效液相色譜(HPLC)分析試劑盒20次
ELISAKitCH50人血清總補體規(guī)格:48T/96T
兔內皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat insulin like growth factor binding protein 4 (IGFBP-4) ELISA Kit 大鼠胰島素樣生長因子結合蛋白4(IGFBP-4)ELISA試劑盒
HumanRotavirusantigen,RVAgELISAKit 人輪狀病毒抗原(RVAg)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISA試劑盒人*酯轉移蛋白(CETP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織長鏈脂酰輔酶A脫氫酶(ACYLCOADEHYDROGENASE)活性比色法定量檢測試劑盒20次
HumanMyeloidProgenitorInhibitoryFactor1,MPIF-1ELISAKit人骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
昆蟲核蛋白/胞漿蛋白提取試劑盒50T實驗方法綿羊白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
綿羊白介素2(IL-2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
綿羊白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
綿羊白介素1(IL-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
請輸入賬號
請輸入密碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業(yè)負責,儀表網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。