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更新時(shí)間:2017-07-10 09:31:51瀏覽次數(shù):154次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
昆蟲蛋白快速提取試劑盒(離心柱法)100T免費(fèi)代測(cè)FAM19A4 Protein Human 重組人 FAM19A4 / TAFA4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
人胰腺星狀細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
MSLN Others Human 人 MSLN / Mesothelin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
BJ細(xì)胞,人皮膚成纖維細(xì)胞系 克柔念珠菌 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B2
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 cDNA
MDA-MB-453(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 狗 CD2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
昆蟲蛋白快速提取試劑盒(離心柱法)100T免費(fèi)代測(cè)使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng) 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
昆蟲蛋白快速提取試劑盒(離心柱法)100T免費(fèi)代測(cè)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
昆蟲蛋白快速提取試劑盒(離心柱法)100T免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長,否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
神經(jīng)少突起前質(zhì)膠質(zhì)細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
EPCAM Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人肺癌細(xì)胞;A549 [A-549]
家貓腎細(xì)胞;CATK1 肝細(xì)胞,HL-7702細(xì)胞 MMQ細(xì)胞,大鼠垂體瘤細(xì)胞
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC-C
RBP4 Others Mouse 小鼠 RBP4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
EFNB3 Others Rat 大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人癌細(xì)胞;SK-BR-3
F344大鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 F344 rat bone marrow mesenchymal stem cells
U373細(xì)胞,人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 福氏志賀氏菌(Shigella flexneri) 人無色素睫狀上皮細(xì)胞RNAHNPCEpiC miRNA5 μg
SK-N-BE(2) (人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
HEC-1-B(人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0418QGY-7703(人肝癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 散鱗鏡鯉尾鰭細(xì)胞;YZ21
大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人肽酰脯氨酰異構(gòu)酶(親環(huán)蛋白)樣1(PPIL1)免疫試劑盒 Human PPIL1 ELISA Kit
土壤無機(jī)磷(S-PHOS)含量測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/24樣
RatTissuefactor,TFELISA試劑盒大鼠組織因子(TF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanleukocytecommonantigen,LCA/CD45ELISA試劑盒人白細(xì)胞共同抗原(LCA/CD45)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanNuclearmatrixprotein22,NMP-22ELISAKit人核基質(zhì)蛋白22(NMP-22)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔醛固酮(ALD)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat insulin like growth factor binding protein 2 (IGFBP-2) ELISA Kit 大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)ELISA試劑盒
HumanTetanusAntibodyELISAKit 人破傷風(fēng)抗體(TetanusAb)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumangelsonELISA試劑盒人凝膠原蛋白(gelson)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織丙型肝炎病毒蛋白酶(HCVPROTEASE)活性熒光淬滅法定量檢測(cè)試劑盒20次
Humanmyosinlightchainkinase,MLCKELISAKit人肌球蛋白輕鏈激酶(MLCK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
昆蟲蛋白快速提取試劑盒(離心柱法)100T免費(fèi)代測(cè)牛丙二酰輔酶A(malonylCoA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
牛白細(xì)胞介素-2(IL-2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
牛白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
牛白介素6(IL-6)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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