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更新時間:2017-07-10 09:31:34瀏覽次數(shù):120次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)酵母線粒體膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
酵母線粒體膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T使用說明書操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
酵母線粒體膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
PPBP Protein Human 重組人 NAP-2 / PPBP / CXCL7 蛋白 (His 標簽)
人甲狀腺濾泡上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
MAG Others Human 人 MAG / GMA / Siglec-4 人細胞裂解液 (陽性對照)
Malmc細胞,人皮膚纖維微細胞系 光滑念珠菌 雜交瘤(B類);IB3C10H12A12G2H8F3
倉鼠腎細胞;HL-1
MDA-MB-435S(人導(dǎo)管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 PD1 / PDCD1 人細胞裂解液 (陽性對照)
膀胱平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
EPCAM Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人卵巢畸胎瘤細胞;PA-1
貓腎細胞;F81 EB病毒轉(zhuǎn)化的B細胞,CGM1細胞 CCC-SMC-2細胞,兔主動脈平滑肌細胞
人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞;NK-92MI [NK92MI]
CD244 Others Human 人 2B4 / SLAMF / CD244 人細胞裂解液 (陽性對照)
人脂肪細胞-皮下(HPA-s)(1×106 )
人癌細胞;MDA-MB-468
CM-R080大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL
C3H/An小鼠結(jié)締組織細胞(L929-TK-);LTK- 小鼠腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
mCF, 小鼠心臟成纖維細胞 Mouse
FOLR1 Others Mouse 小鼠 FOLR1 / FR-alpha 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA試劑盒 ,英文名: PGE1 ELISA Kit
人肽-主要組織相容性復(fù)合體復(fù)合物(pMHC)ELISA檢測試劑盒Humanpeptidemajorhistocompatibilitycomplex,pMHCELISAKit 96T/48T
魚*(腎淀粉樣變)(LZM)免疫試劑盒 Fish lysozyme(renal amyloidosis)(LZM)ELISA kit
CLIAKitforPFKP(Humanphosphofructokinase-plaet)ELISAKit人血小板型磷酸果糖激酶規(guī)格:48T/96T
食物三氯蔗糖(sucralose)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitACTH人促腎上腺皮質(zhì)激素規(guī)格:48T/96T
兔熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat insulin like growth factor binding protein 1 (IGFBP-1) ELISA Kit 大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA試劑盒
HumanLebtospiraIgMELISAKit 人鉤端螺旋體IgM(Lebtospira)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanGelsolin,GSELISA試劑盒人凝溶膠蛋白(GS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織丙同酸激酶(PK)總活性比色法定量檢測試劑盒20次
HumanMyosinlightChain,MLCELISAKit人肌球蛋白輕鏈(MLC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
酵母線粒體膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T使用說明書牛膽酸(Cholicacid)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
牛雌二醇(E2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
牛布魯氏桿菌抗體ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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