酵母膜蛋白/細胞質蛋白提取試劑盒100T實驗方法使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數(shù)量不以應低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
酵母膜蛋白/細胞質蛋白提取試劑盒100T實驗方法操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內(nèi)，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡，并設立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
酵母膜蛋白/細胞質蛋白提取試劑盒100T實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
CCL4 Protein Human 重組人 CCL4 / MIP1B 蛋白 (His 標簽)

人上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL

IL27 Others Mouse 小鼠 IL27 / Interleukin-27 人細胞裂解液 (陽性對照)

TE671 subline No.2細胞，人橫紋肌肉瘤細胞 化膿性鏈球菌 轉PYTL基因小鼠支持細胞;15P-1

兔主動脈平滑肌細胞;CCC-SMC-2

LS-174T(人結腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 人 PRNP / Prion 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]

EPHA2 Others Human 人 EphA2 (aa 585-976) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

JEC, 人子宮內(nèi)膜腺癌細胞系

mRTEC, 小鼠腎小管上皮細胞 小鼠胰腺癌beta細胞，Beta-TC-6細胞 EBTr (NBL-4)(牛胚氣管細胞)

人紅系白血病細胞;TF-1

HAVCR1 Others Canine 狗 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 人細胞裂解液 (陽性對照)
PGA4 Others Human 人 PGA4 / Pepsinogen A 人細胞裂解液 (陽性對照)

人癌細胞;MDA-MB-157

DU 145 人前列腺癌細胞

SW480 [SW-480]人結腸腺癌細胞 SW480 [SW-480] human colon adenocarcinoma cells 1640+10% FBS

CD40LG Protein Rat 重組大鼠 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標簽)

人羊膜上皮細胞(HAEpic)( 5×105 ) C2C12, 小鼠肌原細胞 Mouse
大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人碳酸酐酶3(CA3)免疫試劑盒 Human Carbonic Anhydrase 3,CA3 ELISA Kit

土壤酸性磷酸酶(S-ACP)測試盒 可見分光光度法 50管/48樣

Ratthyrotropin-releasinghormone,TRHELISA試劑盒大鼠促甲狀腺素釋放激素(TRH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanleukocyteantigenA,HLA-AELISA試劑盒人類白細胞抗原A(HLA-A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanN-terminalextein,Ext-NELISAKit人N端外顯肽(Ext-N)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
兔腎素(Renin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat insulin ELISA Kit (INS) 大鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒

HumanVaricellazostervirusIgM,VZVIgMELISAKit 人水痘帶狀皰疹病毒IgM(VZV-IgM)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humangastricinhibitorypolypeptide,GIPELISA試劑盒人胃抑素(GIP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織半*蛋白酶-8(PASE-8)活性熒光定量檢測試劑盒20次

HumanNandrolonePhenylpropionate,NPELISAKit人*/苯丙酸去甲睪同(NP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
酵母膜蛋白/細胞質蛋白提取試劑盒100T實驗方法牛乳酸(Lactate)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

牛熱休克蛋白70（HSP-70）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

牛熱休克蛋白27（HSP-27）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

牛葡萄糖6磷酸脫氫酶(G6PD)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝