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聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
植物內(nèi)質(zhì)網(wǎng)提取試劑盒50T免費(fèi)代測ANGPT2 Protein Human 重組人 Angiopoietin-2 / ANG2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
人支氣管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
ERBB4 Others Rat 大鼠 HER4 / ErbB4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
MuM-2C細(xì)胞, 人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞 赭綠青霉 小鼠成纖維細(xì)胞;φ2
水貂肺上皮細(xì)胞;Mv.1.Lu(NBL-7)
LLC(小鼠肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H2N2 (A/Guiyang/1/1957) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
植物內(nèi)質(zhì)網(wǎng)提取試劑盒50T免費(fèi)代測使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
植物內(nèi)質(zhì)網(wǎng)提取試劑盒50T免費(fèi)代測操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
植物內(nèi)質(zhì)網(wǎng)提取試劑盒50T免費(fèi)代測實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
CL-0405NCI-H716(人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
EPHA3 Others Mouse 小鼠 EphA3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人臍靜脈平滑肌細(xì)胞總RNAHUVSMC tRNA
家兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞;2012083MSC 人主動脈血管平滑肌細(xì)胞,T/G HA-VSMC細(xì)胞 MPC-11細(xì)胞,小鼠漿細(xì)胞瘤
人胚肺成纖維細(xì)胞;MRC-5
HA Others H4N6 甲型流感 H4N6 (A/Swine/Ontario/01911-1/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
EPOR & CD131 Others Human 人 EPOR & CD131 Homodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞HCMSC
HIT-T15 敘利亞倉鼠胰島β細(xì)胞
CM-R035大鼠肝動脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
THP-1人單核白血病細(xì)胞
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY1002 人神經(jīng)元細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
大鼠神經(jīng)降壓肽(NT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人糖蛋白130(gp130)免疫試劑盒 Human gp130 ELISA KIT
土壤纖維素酶(S-CL)測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
RatThyroglobulin,TGELISA試劑盒大鼠甲狀腺球蛋白(TG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanLeucineaminopepridase,LAPELISA試劑盒人亮氨酰氨基肽酶(LAP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanNon-PhosphorylatedInsulin-likegrowthfactorbindingprotein1ELISAKit人未磷酸化類胰島素生長因子結(jié)合蛋白-1ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human plaet membrane glycoprotein IV (GP- IV) ELISA Kit 人血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)ELISA試劑盒
HumanparamyxovirusparotitisIgMELISAKit 人腮腺炎病毒IgMELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humangalactose-6-sulphatesulphatase,Gal-6SELISA試劑盒人半乳糖6酯酶(Gal-6S)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織半*蛋白酶-6(PASE-6)活性比色法定量檢測試劑盒20次
HumanNephrinELISAKit人蛋白(nephrin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物內(nèi)質(zhì)網(wǎng)提取試劑盒50T免費(fèi)代測牛載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
牛孕激素/孕(PROG)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
牛乙酰乙酸檢測(ACAC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
牛乙酰輔酶A羧化酶(ACC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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