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更新時間:2017-07-10 09:20:14瀏覽次數(shù):144次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
植物內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜蛋白提取試劑盒100T使用說明書使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
植物內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜蛋白提取試劑盒100T使用說明書操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
植物內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜蛋白提取試劑盒100T使用說明書實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
ANGPTL7 Protein Canine 重組狗 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 蛋白 (His 標(biāo)簽)
人肺大動脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
SDC1 Others Rat 大鼠 Syndecan-1 / SDC1 / CD138 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
A875細(xì)胞,人黑色素瘤細(xì)胞 阪崎腸桿菌 人紅系白血病細(xì)胞;TF-1
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS4A;Vero-HCV-NS4A
KB(人口腔表皮樣癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 SELP / selectin P / P-selectin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人滑膜細(xì)胞HS
EPHA4 Others Rat 大鼠 EphA4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
HMy2.CIR人B淋巴母細(xì)胞 HMy2.CIR human B lymphoblastoid cell IMDM培養(yǎng)基(GIBCO)+20%FBS
FGF9 Protein Canine 重組狗 FGF9 / FGF-9 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
A3(人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 子宮癌組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)/1ml
IFNA4 Others Mouse 小鼠 IFNA4 / IFNα4 / Interferon alpha-4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞;M619
人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞
BT474細(xì)胞,導(dǎo)管瘤細(xì)胞 人絨毛膜癌,JEG細(xì)胞 人牙周膜成纖維細(xì)胞RNAHPLR miRNA5 μg
EB病毒轉(zhuǎn)化的絨猴淋巴細(xì)胞;B95-8
EFNA3 Others Human 人 EphrinA3 / EFNA3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人糖類抗原125(CA125)免疫試劑盒 Human Carbonhydrate Antigen 125,CA125 ELISA Kit
土壤無機(jī)磷(S-PHOS)含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
RatThrombopoietin,TPOELISA試劑盒大鼠血小板生成素(TPO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanLeptinReceptor,LEPRELISA試劑盒人瘦素受體(LEPR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humannitricoxide,NOELISAKit人一氧化氮(NO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat nicotinamide adenine dinucleotide phosphate (NADPH) ELISA Kit 大鼠*腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA試劑盒
HumanAdenovirusIgG,ADV-IgGELISAKit 人腺病毒IgG(ADV-IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanfreefattyacids,FFAELISA試劑盒人游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織半*蛋白酶-13(PASE-13)活性熒光定量檢測試劑盒20次
HumanNeuroglobin,NGBELISAKit人腦紅蛋白(NGB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜蛋白提取試劑盒100T使用說明書犬瘟熱病毒(CDV)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
犬維生素K1(VK1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
犬維生素E(VE)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
犬維生素A(VA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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