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更新時間:2017-07-10 09:19:28瀏覽次數(shù):186次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)花粉蛋白提取試劑盒50T免費代測實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
花粉蛋白提取試劑盒50T免費代測注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
ANGPTL1 Protein Canine 重組狗 ANGPTL1 / Angiopoietin-like 1 蛋白 (Fc 標簽)
Balb/c小鼠骨髓間質(zhì)干細胞 Balb/c mouse bone marrow mesenchymal stem cells
CD302 Others Rat 大鼠 CD302 / CLEC13A 人細胞裂解液 (陽性對照)
B16細胞,人黑色素瘤細胞 植物乳桿菌 白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細胞;JEG-3/VP16-IL-2
白鰱尾鰭細胞系;SCF
JeKo-1(人套細胞淋巴瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 IL12A / NKSF1 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠骨肉瘤細胞;UMR-106
EPHB1 Others Cynomolgus 食蟹猴 EphB1 / EPHT2 人細胞裂解液 (陽性對照)
腹膜毛細血管內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
HCT-116細胞,低分化結(jié)腸腺癌細胞 人子宮內(nèi)膜腺癌細胞,HEC-1-A細胞 人肺成纖維細胞cDNAHPF cDNA
長尾綠猴腎細胞;4647
HAPLN1 Others Human 人 HAPLN1 人細胞裂解液 (陽性對照)
ERN1 Others Human 人 ERN1 / IRE1 (aa 465-977) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人前脂肪細胞-皮下HPA-s
長尾綠猴胚胎細胞;4179
HL-7702細胞,肝細胞 人結(jié)腸腺癌細胞,LS180細胞 CM-R037大鼠小腸隱窩上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠肺泡巨噬細胞;NR8383[AgC11x3A; NR8383.1]
EPHB2 Others Human 人 EphB2 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠能a1A受體(ADRA1A)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人糖類抗原72-4(CA72-4)免疫試劑盒 Human carbonhydrate antigen 72-4,CA72-4 ELISA kit
組織無機磷含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
Ratthrombinreceptor,TRELISA試劑盒大鼠*受體(TR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanLegionellaantibodyIgM,LPAb-IgMELISA試劑盒人軍團菌抗體IgM(LPAb-IgM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanneutrophilpeptide1-3,HNP1-3ELISAKit人中性粒細胞防御素1-3(HNP1-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat plaet factor 4 (PF-4/CXCL4) ELISA Kit 大鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒
Humananti-respiratorysyncytialvirusantibody,RSVELISAKit 人抗呼吸道合胞病毒抗體(RSV)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanfractalkine/CX3CL1ELISA試劑盒人趨化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織半*蛋白酶-12(PASE-12)活性比色法定量檢測試劑盒20次
Humanneuronalnuclearautoantibody,ANNA-1/HuELISAKit人抗神經(jīng)元核抗體1型/抗Hu抗體(ANNA-1/Hu)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
花粉蛋白提取試劑盒50T免費代測犬壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
犬孕激素/孕(PROG)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
犬乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
犬乙酰*受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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