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更新時間:2017-07-10 09:18:18瀏覽次數(shù):113次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)植物種子蛋白提取試劑盒100T免費(fèi)代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
植物種子蛋白提取試劑盒100T免費(fèi)代測操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
植物種子蛋白提取試劑盒100T免費(fèi)代測實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
WERI-Rb-1(人視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 Adult bone marrow mesenchymal stem cells
CLDN11 Others Human 人 CLDN11 / Claudin-11 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
HS-6細(xì)胞,人黑色素瘤細(xì)胞 德氏乳桿菌保加利亞亞種 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;SH-SY5Y
SV-40轉(zhuǎn)化肺成纖維細(xì)胞;WI38/VA13
IMR-32(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 Raw264.7, 小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞 人前列腺癌細(xì)胞;LNCaP
神經(jīng)前體細(xì)胞分化培養(yǎng)基NPCM
EPHB1 Others Mouse 小鼠 EphB1 / EPHT2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人胚肺成纖維細(xì)胞;HFL-I
F81細(xì)胞,貓腎細(xì)胞 人結(jié)腸癌細(xì)胞,LS174T細(xì)胞 CM-H085人臍動脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
正常大鼠腎細(xì)胞(EGF受體陽性);NRK49F
SCARB1 Others Human 人 SCARB1 / CD36L1 / CLA-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠間骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(RMSC-bm)(5×105)
人前列腺上皮細(xì)胞RNAHPEpiC miRNA5 μg
牛腎細(xì)胞;MDBK(BVDV-free)
小鼠肉瘤瘤株;S180 小鼠表皮角化細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
人羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞 Human
TNFRSF25 Others Human 人 TNFRSF25 / DDR3 / APO3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠足細(xì)胞標(biāo)記蛋白/足盂蛋白(PCX)ELISA試劑盒 ,英文名: PCX ELISA Kit
人糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)ELISA檢測試劑盒Humanglucocorticoidreceptor-α,GR-αELISAKit 96T/48T
大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫試劑盒 Rat monocyte chemotactic protein 1/monocyte chemotactic and activating factor,MCP-1/MCAF ELISA kit
CLIAKitforTRAIL-R1(Humantumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand1)ELISAKit人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1規(guī)格:48T/96T
羥*(HYP)高效液相色譜定量檢測試劑盒20次
ELISAKitAT人抗*規(guī)格:48T/96T
兔乙酰*受體抗體(AChRab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human fibrinogen (Fbg) ELISA Kit 人血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒
HumanCoxsackievirusIgG,CoxV-IgGELISAKit 人柯薩奇病毒IgG(CoxV-IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanFolicacid,FAELISA試劑盒人*(FA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織半*蛋白酶-1(PASE-1)活性比色法定量檢測試劑盒20次
HumanNeurotensin,NISAKit人神經(jīng)降壓素(NT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物種子蛋白提取試劑盒100T免費(fèi)代測人Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人17-類固醇(17-KS)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人17羥孕(17-OHP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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