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更新時(shí)間:2017-07-10 09:16:54瀏覽次數(shù):134次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
我司植物蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購(gòu)模式!我們將竭誠(chéng)為您服務(wù),咨詢!
植物蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50~100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬(wàn)細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
植物蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
(7)PI染色時(shí)間過長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
UMR-106(大鼠骨肉瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
C57BL/6小鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 C57BL/6 mouse bone marrow mesenchymal stem cells
PDIA4 Others Human 人 ERP72 / PDIA4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
HME6細(xì)胞,人黑色素瘤細(xì)胞 動(dòng)物雙歧桿菌 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0919
人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞;NK-92MI [NK92MI]
Hut-102(人皮膚T淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 SKOV3/Taxol-25, 人卵巢癌*耐藥細(xì)胞株 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY1022
CL-0350Hela S3(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
EPHB2 Others Human 人 EphB2 / Hek5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人肺成纖維細(xì)胞總RNAHPF tRNA
Hs-578T細(xì)胞,人癌細(xì)胞 SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,SDBMSC細(xì)胞 Hep-2, 人喉癌細(xì)胞系
NCI-H661(人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
HDBEC Pellet 人皮膚血管內(nèi)皮細(xì)胞團(tuán)塊(少年者) > 1 mio.cells 前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基PAM-prf
SCN2B Others Human 人 SCN2B 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人前列腺平滑肌細(xì)胞RNAHPSMC miRNA5 μg
大額牛腎細(xì)胞;BFR-K1
Hce-8693細(xì)胞,人盲腸腺癌細(xì)胞(未分化) 人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤,Rb細(xì)胞 人Burkkit淋巴瘤細(xì)胞;Daudi
HEp-2(人喉表皮樣癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
ACVR2A Others Human 人 ACVR2 / ACTRII / ACVR2A 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
大鼠腎損傷分子1(Kim-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)免疫試劑盒 Human glucocorticoid receptor-β,GR-β ELISA Kit
血鋅濃度測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/48樣
Ratthioredoxinreductase,TrxRELISA試劑盒大鼠硫氧還蛋白還原酶(TrxR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
humanlectin-galactosebinding-soluble3,Lgals3ELISA試劑盒人可溶性半乳糖苷結(jié)合凝集素3(Lgals3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanneutrophilactivatingprotein-2,NAP-2ELISAKit人中性粒細(xì)胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human Schistosoma (Schistosoma) ELISA Kit 人血吸蟲(schistosoma)ELISA試劑盒
HumanCaspase12,Casp-12ELISAKit 人胱天蛋白酶12(Casp-12)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanFMS-liketyrosinekinase3ligand,Flt-3LELISA試劑盒人FMS樣*激酶3配體(Flt-3L)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織半*(cysteine)含量高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20次
Humanneutrophilelastase,NEELISAKit人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法人Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢNT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人Ⅲ型膠原(ColⅢ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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