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植物蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法

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植物蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
1)取 1060 萬(wàn)細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
植物蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法注意事項(xiàng)
1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
7PI染色時(shí)間過長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
UMR-106(大鼠骨肉瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

C57BL/6小鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 C57BL/6 mouse bone marrow mesenchymal stem cells

PDIA4 Others Human ERP72 / PDIA4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

HME6細(xì)胞,人黑色素瘤細(xì)胞 動(dòng)物雙歧桿菌 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0919

人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞;NK-92MI [NK92MI]

Hut-102(人皮膚T淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 SKOV3/Taxol-25, 人卵巢癌*耐藥細(xì)胞株 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY1022
CL-0350Hela S3(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

EPHB2 Others Human EphB2 / Hek5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人肺成纖維細(xì)胞總RNAHPF tRNA

Hs-578T細(xì)胞,人癌細(xì)胞 SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,SDBMSC細(xì)胞 Hep-2, 人喉癌細(xì)胞系

NCI-H661(人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

HDBEC Pellet 人皮膚血管內(nèi)皮細(xì)胞團(tuán)塊(少年者) > 1 mio.cells 前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基PAM-prf
SCN2B Others Human SCN2B 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人前列腺平滑肌細(xì)胞RNAHPSMC miRNA5 μg

大額牛腎細(xì)胞;BFR-K1

Hce-8693細(xì)胞,人盲腸腺癌細(xì)胞(未分化) 人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤,Rb細(xì)胞 Burkkit淋巴瘤細(xì)胞;Daudi

HEp-2(人喉表皮樣癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

ACVR2A Others Human ACVR2 / ACTRII / ACVR2A 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
大鼠腎損傷分子1(Kim-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)免疫試劑盒 Human glucocorticoid receptor-β,GR-β ELISA Kit

血鋅濃度測(cè)試盒 可見分光光度法 50/48

Ratthioredoxinreductase,TrxRELISA試劑盒大鼠硫氧還蛋白還原酶(TrxR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

humanlectin-galactosebinding-soluble3,Lgals3ELISA試劑盒人可溶性半乳糖苷結(jié)合凝集素3(Lgals3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Humanneutrophilactivatingprotein-2,NAP-2ELISAKit人中性粒細(xì)胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human Schistosoma (Schistosoma) ELISA Kit 人血吸蟲(schistosoma)ELISA試劑盒

HumanCaspase12,Casp-12ELISAKit 人胱天蛋白酶12(Casp-12)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanFMS-liketyrosinekinase3ligand,Flt-3LELISA試劑盒人FMS樣*激酶3配體(Flt-3L)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織半*(cysteine)含量高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20

Humanneutrophilelastase,NEELISAKit人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法人Ⅲ型前膠原基端肽(PNT)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人Ⅲ型膠原(Col)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人Ⅱ型膠原(Col)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

 

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